Metabolomics បែងចែកដុំមហារីកសួតស្លូត និងសាហាវ ជាមួយនឹងភាពជាក់លាក់ខ្ពស់ ដោយប្រើការវិភាគវិសាលគមម៉ាស់ដែលមានគុណភាពបង្ហាញខ្ពស់នៃសេរ៉ូមអ្នកជំងឺ។

ការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យឌីផេរ៉ង់ស្យែលនៃដុំពកសួតដែលកំណត់ដោយការធ្វើកោសល្យវិច័យគណនា (CT) នៅតែជាបញ្ហាប្រឈមក្នុងការអនុវត្តគ្លីនិក។នៅទីនេះ យើងកំណត់លក្ខណៈនៃការរំលាយអាហារសកលនៃគំរូសេរ៉ូមចំនួន 480 រួមទាំងការគ្រប់គ្រងប្រកបដោយសុខភាពល្អ ដុំសាច់សួតស្រាល និងដំណាក់កាលទី 1 មហារីកសួត adenocarcinoma ។មហារីក Adenocarcinomas បង្ហាញទម្រង់មេតាបូលីសប្លែកៗ ចំណែកដុំសាច់ស្លូតបូត និងបុគ្គលដែលមានសុខភាពល្អ មានភាពស្រដៀងគ្នាខ្ពស់នៅក្នុងទម្រង់មេតាបូលីស។នៅក្នុងក្រុមរកឃើញ (n = 306) សំណុំនៃសារធាតុរំលាយអាហារចំនួន 27 ត្រូវបានគេកំណត់អត្តសញ្ញាណដើម្បីសម្គាល់ភាពខុសគ្នារវាងដុំសាច់ស្លូត និងសាហាវ។AUC នៃគំរូរើសអើងនៅក្នុងក្រុមដែលមានសុពលភាពខាងក្នុង (n=104) និងក្រុមសុពលភាពខាងក្រៅ (n=111) គឺ 0.915 និង 0.945 រៀងគ្នា។ការវិភាគផ្លូវបានបង្ហាញពីការកើនឡើងនៃសារធាតុរំលាយអាហារ glycolytic ដែលទាក់ទងនឹងការថយចុះនៃ tryptophan នៅក្នុងសេរ៉ូម adenocarcinoma សួតធៀបនឹងដុំសាច់ស្លូតបូត និងការគ្រប់គ្រងដែលមានសុខភាពល្អ ហើយបានណែនាំថាការស្រូបយក tryptophan ជំរុញ glycolysis នៅក្នុងកោសិកាមហារីកសួត។ការសិក្សារបស់យើងបង្ហាញពីតម្លៃនៃ biomarkers មេតាបូលីតសេរ៉ូមក្នុងការវាយតម្លៃហានិភ័យនៃដុំពកសួតដែលបានរកឃើញដោយ CT ។
ការ​ធ្វើ​រោគវិនិច្ឆ័យ​ទាន់​ពេល​គឺ​មាន​សារៈ​សំខាន់​ក្នុង​ការ​បង្កើន​អត្រា​រស់រាន​មាន​ជីវិត​សម្រាប់​អ្នក​ជំងឺ​មហារីក។លទ្ធផលពីការធ្វើតេស្តពិនិត្យជំងឺមហារីកសួតជាតិរបស់សហរដ្ឋអាមេរិក (NLST) និងការសិក្សា NELSON របស់អឺរ៉ុប បានបង្ហាញថា ការពិនិត្យជាមួយនឹងការវិភាគ tomography កម្រិតទាប (LDCT) អាចកាត់បន្ថយការស្លាប់នៃជំងឺមហារីកសួតយ៉ាងខ្លាំងនៅក្នុងក្រុមដែលមានហានិភ័យខ្ពស់ 1,2,3 ។ចាប់តាំងពីការរីករាលដាលនៃការប្រើប្រាស់ LDCT សម្រាប់ការពិនិត្យជំងឺមហារីកសួត ឧប្បត្តិហេតុនៃការរកឃើញដោយកាំរស្មីដោយចៃដន្យនៃដុំពកសួតដែលមិនមានរោគសញ្ញាបានបន្តកើនឡើង 4 ។ដុំពកសួតត្រូវបានកំណត់ថាជាភាពស្រអាប់ប្រសព្វរហូតដល់ 3 សង់ទីម៉ែត្រនៅក្នុងអង្កត់ផ្ចិត 5 ។យើងប្រឈមមុខនឹងការលំបាកក្នុងការវាយតម្លៃលទ្ធភាពនៃជំងឺសាហាវ និងដោះស្រាយជាមួយនឹងដុំពកសួតដ៏ច្រើនដែលត្រូវបានរកឃើញដោយចៃដន្យនៅលើ LDCT ។ដែនកំណត់នៃ CT អាចនាំឱ្យមានការពិនិត្យតាមដានញឹកញាប់ និងលទ្ធផលវិជ្ជមានមិនពិត ដែលនាំទៅដល់ការអន្តរាគមន៍ដែលមិនចាំបាច់ និងការព្យាបាលហួសកម្រិត 6.ដូច្នេះហើយ ចាំបាច់ត្រូវបង្កើត biomarkers ដែលអាចទុកចិត្តបាន និងមានប្រយោជន៍ ដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណមហារីកសួតបានត្រឹមត្រូវនៅដំណាក់កាលដំបូង និងបែងចែកដុំសាច់ស្លូតត្រង់ភាគច្រើននៅពេលរកឃើញដំបូង 7 ។
ការវិភាគម៉ូលេគុលដ៏ទូលំទូលាយនៃឈាម (សេរ៉ូម ប្លាស្មា កោសិកា mononuclear ឈាមគ្រឿងកុំព្យូទ័រ) រួមទាំងហ្សែន ប្រូតេអូម ឬ DNA methylation8,9,10 បាននាំឱ្យមានការចាប់អារម្មណ៍កាន់តែខ្លាំងឡើងក្នុងការរកឃើញឧបករណ៍សម្គាល់ជីវសាស្ត្រសម្រាប់រោគវិនិច្ឆ័យមហារីកសួត។ទន្ទឹមនឹងនេះ វិធីសាស្ត្រមេតាបូឡូមិច វាស់វែងផលិតផលចុងកោសិកាដែលត្រូវបានជះឥទ្ធិពលដោយសកម្មភាព endogenous និង exogenous ហើយដូច្នេះត្រូវបានអនុវត្តដើម្បីទស្សន៍ទាយការចាប់ផ្តើម និងលទ្ធផលនៃជំងឺ។Liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS) គឺជាវិធីសាស្រ្តដែលត្រូវបានប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយសម្រាប់ការសិក្សាមេតាបូឡូមីក ដោយសារតែភាពប្រែប្រួលខ្ពស់ និងជួរថាមវន្តធំរបស់វា ដែលអាចគ្របដណ្តប់សារធាតុមេតាបូលីតជាមួយនឹងលក្ខណៈសម្បត្តិរូបវិទ្យាផ្សេងគ្នា 11,12,13។ទោះបីជាការវិភាគមេតាបូលីសជាសាកលនៃប្លាស្មា/សេរ៉ូមត្រូវបានគេប្រើដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណ biomarkers ដែលត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យជំងឺមហារីកសួត 14,15,16,17 និងប្រសិទ្ធភាពនៃការព្យាបាលក៏ដោយ 18 ប្រភេទមេតាបូលីតសេរ៉ូមដើម្បីបែងចែករវាងដុំមហារីកសួតស្លូត និងសាហាវ នៅតែត្រូវបានសិក្សាច្រើន។- ការស្រាវជ្រាវដ៏ធំ។
Adenocarcinoma និង squamous cell carcinoma គឺជាប្រភេទរងសំខាន់ពីរនៃជំងឺមហារីកសួតមិនមែនកោសិកាតូច (NSCLC) ។ការធ្វើតេស្ត CT ជាច្រើនបង្ហាញថា adenocarcinoma គឺជាប្រភេទមហារីកសួតទូទៅបំផុត 1,19,20,21។នៅក្នុងការសិក្សានេះ យើងបានប្រើ ultra-performance liquid chromatography-high-resolution mass spectrometry (UPLC-HRMS) ដើម្បីអនុវត្តការវិភាគមេតាបូលីមលើសំណាកសេរ៉ូមសរុបចំនួន 695 រួមទាំងការគ្រប់គ្រងសុខភាព ដុំពកស្លូតបូត និង CT-detected ≤3 សង់ទីម៉ែត្រ។ការពិនិត្យរកមើលមហារីកសួតដំណាក់កាលទី 1 ។យើងបានរកឃើញបន្ទះនៃសារធាតុមេតាបូលីតសេរ៉ូមដែលបែងចែកមហារីកសួតពីដុំសាច់ស្លូតបូត និងការគ្រប់គ្រងប្រកបដោយសុខភាពល្អ។ការវិភាគលើការពង្រឹងផ្លូវបានបង្ហាញថាការរំលាយអាហារ tryptophan និងគ្លុយកូសមិនធម្មតាគឺជាការផ្លាស់ប្តូរទូទៅនៅក្នុង adenocarcinoma សួតបើធៀបនឹងដុំសាច់ស្រាល និងការគ្រប់គ្រងដែលមានសុខភាពល្អ។ជាចុងក្រោយ យើងបានបង្កើត និងធ្វើឱ្យមានសុពលភាពអ្នកចាត់ថ្នាក់មេតាបូលីសនៃសេរ៉ូម ជាមួយនឹងភាពជាក់លាក់ និងភាពរសើបខ្ពស់ ដើម្បីបែងចែករវាងដុំមហារីកសួតដែលសាហាវ និងស្លូតបូត ដែលរកឃើញដោយ LDCT ដែលអាចជួយក្នុងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យឌីផេរ៉ង់ស្យែលដំបូង និងការវាយតម្លៃហានិភ័យ។
នៅក្នុងការសិក្សាបច្ចុប្បន្ន សំណាកសេរ៉ូមដែលផ្គូផ្គងនឹងភេទ និងអាយុត្រូវបានប្រមូលត្រឡប់មកវិញពីការត្រួតពិនិត្យសុខភាពចំនួន 174 អ្នកជំងឺ 292 នាក់ដែលមានដុំសាច់សួតស្រាល និងអ្នកជំងឺ 229 នាក់ដែលមានជំងឺមហារីកសួតដំណាក់កាលទី 1 ។លក្ខណៈប្រជាសាស្រ្តនៃមុខវិជ្ជាចំនួន 695 ត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងតារាងបន្ថែម 1 ។
ដូចដែលបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 1a គំរូសេរ៉ូមសរុបចំនួន 480 រួមទាំង 174 ការត្រួតពិនិត្យសុខភាព (HC) 170 nodules benign (BN) និង 136 stage I lung adenocarcinoma (LA) សំណាកត្រូវបានប្រមូលនៅមជ្ឈមណ្ឌលមហារីកសាកលវិទ្យាល័យ Sun Yat-sen ។ក្រុម Discovery សម្រាប់​ការ​កំណត់​ទម្រង់​មេតាបូឡូមីត​ដែល​មិន​បាន​កំណត់​គោល​ដៅ​ដោយ​ប្រើ​ក្រូម៉ាតូ​ក្រាម​រាវ​ដែល​មាន​ប្រសិទ្ធភាព​ខ្ពស់​-គុណភាព​បង្ហាញ​ខ្ពស់ (UPLC-HRMS)។ដូចដែលបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពបន្ថែមទី 1 សារធាតុរំលាយអាហារឌីផេរ៉ង់ស្យែលរវាង LA និង HC, LA និង BN ត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណដើម្បីបង្កើតគំរូចំណាត់ថ្នាក់ និងស្វែងរកការវិភាគផ្លូវឌីផេរ៉ង់ស្យែលបន្ថែមទៀត។សំណាកចំនួន 104 ដែលប្រមូលបានដោយមជ្ឈមណ្ឌលមហារីកសាកលវិទ្យាល័យ Sun Yat-sen និង 111 សំណាកដែលប្រមូលដោយមន្ទីរពេទ្យពីរផ្សេងទៀតត្រូវបានទទួលរងនូវសុពលភាពខាងក្នុង និងខាងក្រៅរៀងៗខ្លួន។
ការសិក្សាចំនួនប្រជាជននៅក្នុងក្រុមនៃរបកគំហើញដែលឆ្លងកាត់ការវិភាគមេតាបូឡូមីសក្នុងសេរ៉ូមជាសាកល ដោយប្រើក្រូម៉ាតូក្រាមរាវដែលមានប្រសិទ្ធភាពជ្រុល-គុណភាពបង្ហាញខ្ពស់ (UPLC-HRMS) ។b ការវិភាគការរើសអើងការេដោយផ្នែកតិចបំផុត (PLS-DA) នៃមេតាបូឡូមសរុបនៃសំណាកសេរ៉ូមចំនួន 480 ពីក្រុមសិក្សា រួមទាំងការគ្រប់គ្រងដែលមានសុខភាពល្អ (HC, n=174), ដុំសាច់ស្លូត (BN, n=170) និងដំណាក់កាលទី 1 មហារីកសួត adenocarcinoma (ទីក្រុង Los Angeles, n = 136) ។+ ESI, របៀបអ៊ីយ៉ុងអេឡិចត្រិចវិជ្ជមាន, -ESI, របៀបអ៊ីយ៉ូដអេឡិចត្រូតអវិជ្ជមាន។c–e មេតាបូលីតដែលមានភាពសម្បូរបែបខុសគ្នាយ៉ាងខ្លាំងនៅក្នុងក្រុមដែលបានផ្តល់ឱ្យពីរ (ការធ្វើតេស្តចំណាត់ថ្នាក់ដែលបានចុះហត្ថលេខា Wilcoxon កន្ទុយពីរ អត្រារកឃើញមិនពិតដែលបានកែតម្រូវតម្លៃ p FDR <0.05) ត្រូវបានបង្ហាញជាពណ៌ក្រហម (ការផ្លាស់ប្តូរផ្នត់> 1.2) និងពណ៌ខៀវ (ការផ្លាស់ប្តូរផ្នត់ <0.83) .) បង្ហាញនៅលើក្រាហ្វិកភ្នំភ្លើង។f ផែនទីកំដៅចង្កោមតាមឋានានុក្រមដែលបង្ហាញពីភាពខុសគ្នាយ៉ាងសំខាន់នៅក្នុងចំនួននៃសារធាតុរំលាយអាហារដែលបានកត់សម្គាល់រវាង LA និង BN ។ទិន្នន័យប្រភពត្រូវបានផ្តល់ជាទម្រង់ឯកសារទិន្នន័យប្រភព។
ការរំលាយអាហារសេរ៉ូមសរុបនៃ 174 HC, 170 BN និង 136 LA នៅក្នុងក្រុមរកឃើញត្រូវបានវិភាគដោយប្រើការវិភាគ UPLC-HRMS ។ដំបូងយើងបង្ហាញថាការត្រួតពិនិត្យគុណភាព (QC) សំណាកយ៉ាងតឹងរ៉ឹងនៅចំកណ្តាលនៃគំរូនៃការវិភាគសមាសធាតុចម្បងដែលមិនមានការត្រួតត្រា (PCA) ដែលបញ្ជាក់ពីស្ថេរភាពនៃការអនុវត្តការសិក្សាបច្ចុប្បន្ន (រូបភាពបន្ថែម 2)។
ដូចដែលបានបង្ហាញនៅក្នុងការវិភាគការរើសអើងការេដោយផ្នែក (PLS-DA) ក្នុងរូបភាពទី 1 ខ យើងបានរកឃើញថាមានភាពខុសប្លែកគ្នាយ៉ាងច្បាស់រវាង LA និង BN, LA និង HC ក្នុងទម្រង់វិជ្ជមាន (+ESI) និងអវិជ្ជមាន (−ESI) អេឡិចត្រូតអ៊ីយ៉ុង .ឯកោទោះយ៉ាងណាក៏ដោយ មិនមានភាពខុសប្លែកគ្នាគួរឱ្យកត់សម្គាល់រវាង BN និង HC នៅក្នុងលក្ខខណ្ឌ + ESI និង -ESI ទេ។
យើងបានរកឃើញលក្ខណៈពិសេសឌីផេរ៉ង់ស្យែល 382 រវាង LA និង HC លក្ខណៈពិសេសឌីផេរ៉ង់ស្យែល 231 រវាង LA និង BN និង 95 លក្ខណៈឌីផេរ៉ង់ស្យែលរវាង BN និង HC (ការសាកល្បងចំណាត់ថ្នាក់ដែលបានចុះហត្ថលេខា Wilcoxon FDR <0.05 និងការផ្លាស់ប្តូរច្រើន>1.2 ឬ <0.83) (រូបភាព .1c-e ).Peaks ត្រូវបានកត់សម្គាល់បន្ថែម (ទិន្នន័យបន្ថែម 3) ប្រឆាំងនឹងមូលដ្ឋានទិន្នន័យ (បណ្ណាល័យ mzCloud/HMDB/Chemspider) ដោយតម្លៃ m/z, ពេលវេលារក្សាទុក និងការស្វែងរកវិសាលគមនៃការបែងចែក (ព័ត៌មានលម្អិតដែលបានពិពណ៌នានៅក្នុងផ្នែកវិធីសាស្រ្ត) 22 .ជាចុងក្រោយ សារធាតុរំលាយអាហារដែលបានកំណត់ចំណាំចំនួន 33 និង 38 ដែលមានភាពខុសគ្នាយ៉ាងសំខាន់ក្នុងភាពសម្បូរបែបត្រូវបានគេកំណត់អត្តសញ្ញាណសម្រាប់ LA ធៀបនឹង BN (រូបភាពទី 1f និងតារាងបន្ថែម 2) និង LA ធៀបនឹង HC (រូបភាពបន្ថែមទី 3 និងតារាងបន្ថែម 2) រៀងគ្នា។ផ្ទុយទៅវិញមានតែសារធាតុមេតាបូលីតចំនួន 3 ប៉ុណ្ណោះដែលមានភាពខុសគ្នាយ៉ាងសំខាន់ក្នុងភាពសម្បូរបែបត្រូវបានកំណត់នៅក្នុង BN និង HC (តារាងបន្ថែម 2) ដែលស្របជាមួយនឹងការត្រួតស៊ីគ្នារវាង BN និង HC នៅក្នុង PLS-DA ។មេតាបូលីតឌីផេរ៉ង់ស្យែលទាំងនេះគ្របដណ្តប់ជួរដ៏ធំទូលាយនៃជីវគីមី (រូបភាពបន្ថែមទី 4) ។សរុបមក លទ្ធផលទាំងនេះបង្ហាញពីការផ្លាស់ប្តូរដ៏សំខាន់នៅក្នុងសារធាតុមេតាបូឡូមក្នុងសេរ៉ូម ដែលឆ្លុះបញ្ចាំងពីការផ្លាស់ប្តូរដ៏សាហាវនៃជំងឺមហារីកសួតដំណាក់កាលដំបូង បើប្រៀបធៀបជាមួយនឹងដុំមហារីកសួតស្រាល ឬប្រភេទដែលមានសុខភាពល្អ។ទន្ទឹមនឹងនេះ ភាពស្រដៀងគ្នានៃសារធាតុមេតាបូឡូមនៃសេរ៉ូម BN និង HC បង្ហាញថាដុំពកស្លូតបូតអាចចែករំលែកលក្ខណៈជីវសាស្រ្តជាច្រើនជាមួយបុគ្គលដែលមានសុខភាពល្អ។ដោយសារការផ្លាស់ប្តូរហ្សែនរបស់ epidermal growth factor receptor (EGFR) គឺជារឿងធម្មតានៅក្នុងសួត adenocarcinoma subtype 23 យើងបានស្វែងរកដើម្បីកំណត់ពីផលប៉ះពាល់នៃការផ្លាស់ប្តូររបស់អ្នកបើកបរទៅលើ serum metabolome ។បន្ទាប់មកយើងបានវិភាគទម្រង់មេតាបូលីសសរុបនៃ 72 ករណីដែលមានស្ថានភាព EGFR នៅក្នុងក្រុមមហារីកសួត។គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ យើងបានរកឃើញទម្រង់ប្រៀបធៀបរវាងអ្នកជំងឺ EGFR mutant (n = 41) និង EGFR wild-type patient (n = 31) នៅក្នុងការវិភាគ PCA (រូបភាពបន្ថែម 5a)។ទោះបីជាយ៉ាងណាក៏ដោយ យើងបានកំណត់អត្តសញ្ញាណមេតាបូលីតចំនួន 7 ដែលភាពសម្បូរបែបត្រូវបានផ្លាស់ប្តូរយ៉ាងខ្លាំងចំពោះអ្នកជំងឺដែលមានការផ្លាស់ប្តូរ EGFR បើប្រៀបធៀបទៅនឹងអ្នកជំងឺដែលមាន EGFR ប្រភេទព្រៃ (t test, p < 0.05 និងការផ្លាស់ប្តូរផ្នត់ > 1.2 ឬ < 0.83) (រូបភាពបន្ថែម 5b) ។ភាគច្រើននៃសារធាតុរំលាយអាហារទាំងនេះ (5 ក្នុងចំណោម 7) គឺជា acylcarnitines ដែលដើរតួនាទីយ៉ាងសំខាន់ក្នុងផ្លូវអុកស៊ីតកម្មអាស៊ីតខ្លាញ់។
ដូចដែលបានបង្ហាញនៅក្នុងលំហូរការងារដែលបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 2 a ជីវមាត្រសម្រាប់ការចាត់ថ្នាក់ nodule ត្រូវបានទទួលដោយប្រើប្រតិបត្តិកររួញតូចដាច់ខាត និងការជ្រើសរើសដោយផ្អែកលើ 33 metabolites ឌីផេរ៉ង់ស្យែលដែលបានកំណត់នៅក្នុង LA (n = 136) និង BN (n = 170) ។ការរួមបញ្ចូលគ្នាដ៏ល្អបំផុតនៃអថេរ (LASSO) - គំរូតំរែតំរង់ភស្តុភារគោលពីរ។ការផ្ទៀងផ្ទាត់ដប់ដងត្រូវបានប្រើដើម្បីសាកល្បងភាពជឿជាក់នៃគំរូ។ការជ្រើសរើសអថេរ និងការធ្វើឱ្យទៀងទាត់ប៉ារ៉ាម៉ែត្រត្រូវបានកែតម្រូវដោយការពិន័យអតិបរមាលទ្ធភាពជាមួយប៉ារ៉ាម៉ែត្រ λ24 ។ការវិភាគមេតាបូឡូមសកលត្រូវបានអនុវត្តដោយឯករាជ្យនៅក្នុងក្រុមដែលមានសុពលភាពខាងក្នុង (n=104) និងក្រុមការបញ្ជាក់ខាងក្រៅ (n=111) ដើម្បីសាកល្បងដំណើរការចាត់ថ្នាក់នៃគំរូរើសអើង។ជាលទ្ធផល សារធាតុមេតាបូលីតចំនួន 27 នៅក្នុងសំណុំនៃរបកគំហើញត្រូវបានកំណត់ថាជាគំរូនៃការរើសអើងល្អបំផុតជាមួយនឹងតម្លៃ AUC មធ្យមធំបំផុត (រូបភាព 2b) ដែលក្នុងនោះ 9 មានសកម្មភាពកើនឡើង និង 18 សកម្មភាពថយចុះនៅក្នុង LA បើប្រៀបធៀបទៅនឹង BN (រូបភាព 2c) ។
លំហូរការងារសម្រាប់ការកសាងឧបករណ៍ចាត់ថ្នាក់ដុំពកសួត រួមទាំងការជ្រើសរើសបន្ទះល្អបំផុតនៃសារធាតុមេតាបូលីតសេរ៉ូមនៅក្នុងសំណុំនៃការរកឃើញដោយប្រើគំរូតំរែតំរង់ប្រព័ន្ធគោលពីរតាមរយៈការផ្ទៀងផ្ទាត់ដប់ដង និងការវាយតម្លៃការអនុវត្តការព្យាករណ៍នៅក្នុងសំណុំសុពលភាពខាងក្នុង និងខាងក្រៅ។b ស្ថិតិសុពលភាពឆ្លងនៃគំរូតំរែតំរង់ LASSO សម្រាប់ការជ្រើសរើស biomarker មេតាប៉ូលីស។លេខដែលបានផ្តល់ឱ្យខាងលើតំណាងឱ្យចំនួនមធ្យមនៃ biomarkers ដែលបានជ្រើសរើសនៅ λ ដែលបានផ្តល់ឱ្យ។បន្ទាត់ចំនុចពណ៌ក្រហមតំណាងឱ្យតម្លៃ AUC ជាមធ្យមនៅ lambda ដែលត្រូវគ្នា។របារកំហុសពណ៌ប្រផេះតំណាងឱ្យតម្លៃ AUC អប្បបរមា និងអតិបរមា។បន្ទាត់ចំនុចបង្ហាញពីគំរូដ៏ល្អបំផុតជាមួយនឹង 27 biomarkers ដែលបានជ្រើសរើស។AUC, តំបន់នៅក្រោមខ្សែកោងលក្ខណៈប្រតិបត្តិការអ្នកទទួល (ROC) ។c បត់ការផ្លាស់ប្តូរនៃសារធាតុមេតាបូលីតដែលបានជ្រើសរើសចំនួន 27 នៅក្នុងក្រុម LA ធៀបនឹងក្រុម BN នៅក្នុងក្រុមរកឃើញ។ជួរឈរក្រហម - ធ្វើឱ្យសកម្ម។ជួរឈរពណ៌ខៀវគឺជាការធ្លាក់ចុះ។d-f ខ្សែកោងលក្ខណៈប្រតិបត្តិការរបស់អ្នកទទួល (ROC) បង្ហាញពីថាមពលនៃគំរូរើសអើងដោយផ្អែកលើ 27 បន្សំមេតាបូលីតនៅក្នុងសំណុំការរកឃើញ ខាងក្នុង និងខាងក្រៅ។ទិន្នន័យប្រភពត្រូវបានផ្តល់ជាទម្រង់ឯកសារទិន្នន័យប្រភព។
គំរូព្យាករណ៍ត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយផ្អែកលើមេគុណតំរែតំរង់ទម្ងន់នៃសារធាតុមេតាបូលីតទាំង 27 នេះ (តារាងបន្ថែមទី 3)។ការវិភាគ ROC ដោយផ្អែកលើសារធាតុមេតាបូលីតទាំង 27 នេះបានផ្តល់ផលតំបន់មួយក្រោមតម្លៃខ្សែកោង (AUC) នៃ 0.933 ភាពប្រែប្រួលនៃក្រុមការរកឃើញគឺ 0.868 និងភាពជាក់លាក់គឺ 0.859 (រូបភាព 2 ឃ) ។ទន្ទឹមនឹងនេះដែរ ក្នុងចំណោមសារធាតុរំលាយអាហារឌីផេរ៉ង់ស្យែលចំនួន 38 ដែលត្រូវបានកត់សម្គាល់រវាង LA និង HC សំណុំនៃសារធាតុរំលាយអាហារចំនួន 16 សម្រេចបាន AUC នៃ 0.902 ជាមួយនឹងភាពប្រែប្រួលនៃ 0.801 និងភាពជាក់លាក់នៃ 0.856 ក្នុងការរើសអើង LA ពី HC (រូបភាពបន្ថែម 6a-c) ។តម្លៃ AUC ដោយផ្អែកលើកម្រិតនៃការផ្លាស់ប្តូរផ្នត់ផ្សេងគ្នាសម្រាប់មេតាបូលីតឌីផេរ៉ង់ស្យែលក៏ត្រូវបានប្រៀបធៀបផងដែរ។យើងបានរកឃើញថាគំរូចំណាត់ថ្នាក់ដំណើរការបានល្អបំផុតក្នុងការរើសអើងរវាង LA និង BN (HC) នៅពេលដែលកម្រិតនៃការផ្លាស់ប្តូរផ្នត់ត្រូវបានកំណត់ទៅ 1.2 ធៀបនឹង 1.5 ឬ 2.0 (រូបភាពបន្ថែម 7a,b)។គំរូនៃការចាត់ថ្នាក់ ដោយផ្អែកលើក្រុមមេតាបូលីតចំនួន 27 ក្រុម ត្រូវបានធ្វើឱ្យមានសុពលភាពបន្ថែមទៀតនៅក្នុងក្រុមខាងក្នុង និងខាងក្រៅ។AUC គឺ 0.915 (ភាពប្រែប្រួល 0.867 ជាក់លាក់ 0.811) សម្រាប់សុពលភាពខាងក្នុង និង 0.945 (ភាពប្រែប្រួល 0.810 ភាពជាក់លាក់ 0.979) សម្រាប់សុពលភាពខាងក្រៅ (រូបភាព 2e, f)។ដើម្បីវាយតម្លៃប្រសិទ្ធភាពនៃមន្ទីរពិសោធន៍ គំរូចំនួន 40 ពីក្រុមខាងក្រៅត្រូវបានវិភាគនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ខាងក្រៅ ដូចដែលបានពិពណ៌នានៅក្នុងផ្នែកវិធីសាស្ត្រ។ភាពត្រឹមត្រូវនៃការចាត់ថ្នាក់សម្រេចបាន AUC នៃ 0.925 (រូបភាពបន្ថែម 8) ។ដោយសារតែជំងឺមហារីកសួតកោសិកា squamous cell carcinoma (LUSC) គឺជាប្រភេទរងទូទៅបំផុតទីពីរនៃជំងឺមហារីកសួតមិនមែនកោសិកាតូច (NSCLC) បន្ទាប់ពី សួត adenocarcinoma (LUAD) យើងក៏បានសាកល្បងឧបករណ៍ប្រើប្រាស់សក្តានុពលដែលមានសុពលភាពនៃទម្រង់មេតាបូលីស។BN និង 16 ករណីនៃ LUSC ។AUC នៃការរើសអើងរវាង LUSC និង BN គឺ 0.776 (រូបភាពបន្ថែម 9) ដែលបង្ហាញពីសមត្ថភាពអន់ជាងបើប្រៀបធៀបទៅនឹងការរើសអើងរវាង LUAD និង BN ។
ការសិក្សាបានបង្ហាញថាទំហំនៃដុំពកនៅលើរូបភាព CT មានទំនាក់ទំនងជាវិជ្ជមានជាមួយនឹងលទ្ធភាពនៃជំងឺមហារីក ហើយនៅតែជាកត្តាកំណត់សំខាន់នៃការព្យាបាល nodule 25,26,27។ការវិភាគទិន្នន័យពីក្រុមធំនៃការសិក្សាពិនិត្យ NELSON បានបង្ហាញថា ហានិភ័យនៃជំងឺសាហាវចំពោះមុខវិជ្ជាដែលមានថ្នាំង <5 ម.ម គឺស្រដៀងគ្នាទៅនឹងប្រធានបទដែលគ្មានថ្នាំង 28 ដែរ។ដូច្នេះ ទំហំអប្បបរមាដែលត្រូវការការត្រួតពិនិត្យ CT ទៀងទាត់គឺ 5 មីលីម៉ែត្រ ដូចដែលបានណែនាំដោយ British Thoracic Society (BTS) និង 6 មីលីម៉ែត្រ ដូចដែលបានណែនាំដោយ Fleischner Society 29 ។ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ដុំពកដែលមានទំហំធំជាង 6 មីលីម៉ែត្រ និងដោយគ្មានលក្ខណៈពិសេសជាក់ស្តែង ដែលហៅថាដុំពកមិនកំណត់ (IPN) នៅតែជាបញ្ហាប្រឈមដ៏សំខាន់ក្នុងការវាយតម្លៃ និងការគ្រប់គ្រងក្នុងការអនុវត្តគ្លីនិក30,31។យើងបានពិនិត្យបន្ទាប់ថាតើទំហំ nodule មានឥទ្ធិពលលើហត្ថលេខាមេតាបូលីស ដោយប្រើសំណាកដែលរួមបញ្ចូលគ្នាពីការរកឃើញ និងក្រុមដែលមានសុពលភាពខាងក្នុងដែរឬទេ។ដោយផ្តោតលើ biomarkers ដែលមានសុពលភាពចំនួន 27 ដំបូងយើងបានប្រៀបធៀបទម្រង់ PCA នៃ HC និង BN sub-6 mm metabolomes ។យើងបានរកឃើញថាភាគច្រើននៃចំណុចទិន្នន័យសម្រាប់ HC និង BN ត្រួតលើគ្នា ដែលបង្ហាញថាកម្រិតមេតាបូលីតសេរ៉ូមគឺស្រដៀងគ្នានៅក្នុងក្រុមទាំងពីរ (រូបភាព 3a) ។ផែនទីលក្ខណៈពិសេសនៅទូទាំងជួរទំហំផ្សេងគ្នានៅតែរក្សាទុកនៅក្នុង BN និង LA (រូបភាព 3b, គ) ចំណែកឯការបំបែកត្រូវបានគេសង្កេតឃើញរវាងដុំមហារីក និងស្លូតក្នុងចន្លោះ 6-20 mm (រូបភាព 3d)។ក្រុមនេះមាន AUC នៃ 0.927 ភាពជាក់លាក់ 0.868 និងភាពប្រែប្រួលនៃ 0.820 សម្រាប់ការទស្សន៍ទាយពីភាពសាហាវនៃ nodules ដែលវាស់ពី 6 ទៅ 20 mm (រូបភាព 3e, f)។លទ្ធផលរបស់យើងបង្ហាញថាអ្នកចាត់ថ្នាក់អាចចាប់យកការផ្លាស់ប្តូរមេតាបូលីសដែលបណ្តាលមកពីការផ្លាស់ប្តូរសាហាវដំបូង ដោយមិនគិតពីទំហំដុំពក។
ad ការប្រៀបធៀបទម្រង់ PCA រវាងក្រុមដែលបានបញ្ជាក់ដោយផ្អែកលើការចាត់ថ្នាក់មេតាបូលីស 27 មេតាបូលីត។CC និង BN < 6 ម។b BN < 6 mm ទល់នឹង BN 6–20 mm ។នៅ LA 6-20 មមធៀបនឹង LA 20-30 ម។g BN 6–20 mm និង LA 6–20 mm។GC, n = 174;BN < 6 mm, n = 153;BN 6–20 mm, n = 91;LA 6–20 mm, n = 89;LA 20–30 mm, n = 77. e លក្ខណៈប្រតិបត្តិការអ្នកទទួល (ROC) ខ្សែកោងបង្ហាញពីការអនុវត្តគំរូដែលរើសអើងសម្រាប់ nodules 6–20 mm។f តម្លៃប្រូបាប៊ីលីតេត្រូវបានគណនាដោយផ្អែកលើគំរូតំរែតំរង់តក្កកម្មសម្រាប់ nodules វាស់ 6-20 ម។បន្ទាត់ចំនុចប្រផេះតំណាងឱ្យតម្លៃកាត់ផ្តាច់ល្អបំផុត (0.455)។លេខខាងលើតំណាងឱ្យភាគរយនៃករណីដែលបានព្យាករសម្រាប់ទីក្រុង Los Angeles ។ប្រើតេស្តសិស្សដែលមានកន្ទុយពីរ។PCA, ការវិភាគសមាសភាគសំខាន់។តំបន់ AUC នៅក្រោមខ្សែកោង។ទិន្នន័យប្រភពត្រូវបានផ្តល់ជាទម្រង់ឯកសារទិន្នន័យប្រភព។
សំណាកចំនួនបួន (អាយុ 44-61 ឆ្នាំ) ដែលមានទំហំប្រហោងសួតស្រដៀងគ្នា (7-9 ម.ម) ត្រូវបានជ្រើសរើសបន្ថែមទៀត ដើម្បីបង្ហាញពីដំណើរការនៃគំរូព្យាករមហារីកដែលបានស្នើឡើង (រូបភាព 4a, ខ)។នៅលើការពិនិត្យដំបូង ករណីទី 1 បានបង្ហាញជាដុំរឹងដែលមានជាតិកាល់ស្យូម ដែលជាលក្ខណៈពិសេសដែលត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងភាពស្លូតបូត ចំណែកករណីទី 2 បានបង្ហាញជាដុំរឹងដោយផ្នែកដែលមិនអាចកំណត់បានដោយមិនមានលក្ខណៈពិសេសជាក់ស្តែង។ការស្កេន CT តាមដានចំនួនបីជុំបានបង្ហាញថាករណីទាំងនេះនៅតែមានស្ថេរភាពក្នុងរយៈពេល 4 ឆ្នាំហើយដូច្នេះត្រូវបានចាត់ទុកថាជាដុំពក (រូបភាព 4a) ។បើប្រៀបធៀបជាមួយនឹងការវាយតម្លៃគ្លីនិកនៃការស្កែន CT សៀរៀល ការវិភាគមេតាបូលីតសេរ៉ូមបាញ់តែមួយដងជាមួយនឹងគំរូចាត់ថ្នាក់បច្ចុប្បន្នបានយ៉ាងរហ័ស និងត្រឹមត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណ Nodules ស្លូតបូតទាំងនេះដោយផ្អែកលើឧបសគ្គដែលអាចកើតមាន (តារាងទី 1)។រូបភាពទី 4b ក្នុងករណីទី 3 បង្ហាញដុំពកដែលមានសញ្ញានៃការដក pleural ដែលភាគច្រើនត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងជំងឺសាហាវ32។ករណីទី 4 បានបង្ហាញជាដុំរឹងដោយផ្នែកដែលមិនអាចកំណត់បានដោយគ្មានភស្តុតាងនៃមូលហេតុស្រាល។ករណី​ទាំង​អស់​នេះ​ត្រូវ​បាន​ព្យាករ​ថា​ជា​ជំងឺ​សាហាវ​យោង​តាម​គំរូ​អ្នក​ចាត់​ថ្នាក់ (តារាង​ទី ១)។ការវាយតម្លៃនៃជំងឺមហារីកសួតត្រូវបានបង្ហាញដោយការពិនិត្យ histopathological បន្ទាប់ពីការវះកាត់វះកាត់សួត (រូបភាព 4b) ។សម្រាប់សំណុំសុពលភាពខាងក្រៅ អ្នកចាត់ថ្នាក់មេតាបូលីសបានព្យាករណ៍យ៉ាងត្រឹមត្រូវនូវករណីពីរនៃដុំពកសួតដែលមិនអាចកំណត់បានដែលមានទំហំធំជាង 6 មីលីម៉ែត្រ (រូបភាពបន្ថែម 10)។
រូបភាព CT នៃបង្អួចអ័ក្សនៃសួតនៃករណីពីរនៃ nodules ស្រាល។ក្នុងករណីទី 1 ការស្កេន CT បន្ទាប់ពី 4 ឆ្នាំបានបង្ហាញពីដុំសាច់រឹងដែលមានស្ថេរភាពដែលវាស់ 7 មីលីម៉ែត្រជាមួយនឹងការធ្វើ calcification នៅផ្នែកខាងក្រោមខាងស្តាំ។ក្នុងករណីទី 2 ការស្កេន CT បន្ទាប់ពី 5 ឆ្នាំបានបង្ហាញឱ្យឃើញនូវដុំពករឹងមួយផ្នែកដែលមានអង្កត់ផ្ចិត 7 មីលីម៉ែត្រនៅផ្នែកខាងលើខាងស្តាំ។b រូបភាព CT បង្អួចអ័ក្សនៃសួត និងការសិក្សារោគសាស្ត្រដែលត្រូវគ្នានៃករណីពីរនៃដំណាក់កាលទី 1 នៃ adenocarcinoma មុនពេលវះកាត់សួត។ករណីទី 3 បានបង្ហាញដុំពកដែលមានអង្កត់ផ្ចិត 8 ម.ករណីទី 4 បានបង្ហាញពីដុំកញ្ចក់ដីរឹងមួយផ្នែកដែលវាស់ 9 មីលីម៉ែត្រនៅក្នុង lobe ខាងលើខាងឆ្វេង។ស្នាមប្រឡាក់ Hematoxylin និង eosin (H&E) នៃជាលិកាសួតដែលបានកែច្នៃឡើងវិញ (របារមាត្រដ្ឋាន = 50 μm) បង្ហាញពីគំរូនៃការលូតលាស់នៃជំងឺមហារីកសួត។ព្រួញបង្ហាញពីដុំពកដែលបានរកឃើញនៅលើរូបភាព CT ។រូបភាព H&E គឺជារូបភាពតំណាងនៃវាលមីក្រូទស្សន៍ច្រើន (>3) ដែលត្រូវបានពិនិត្យដោយគ្រូពេទ្យរោគ។
រួមគ្នា លទ្ធផលរបស់យើងបង្ហាញពីតម្លៃសក្តានុពលនៃ biomarkers មេតាបូលីតសេរ៉ូមក្នុងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យឌីផេរ៉ង់ស្យែលនៃដុំពកសួត ដែលអាចបង្កឱ្យមានបញ្ហាប្រឈមនៅពេលវាយតម្លៃ CT screening ។
ដោយផ្អែកលើបន្ទះមេតាបូលីតឌីផេរ៉ង់ស្យែលដែលមានសុពលភាព យើងបានស្វែងរកដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណទំនាក់ទំនងជីវសាស្រ្តនៃការផ្លាស់ប្តូរមេតាបូលីសសំខាន់ៗ។ការវិភាគលើការពង្រឹងផ្លូវ KEGG ដោយ MetaboAnalyst បានកំណត់ផ្លូវផ្លាស់ប្តូរយ៉ាងសំខាន់ចំនួន 6 រវាងក្រុមដែលបានផ្តល់ឱ្យទាំងពីរ (LA ទល់នឹង HC និង LA ទល់នឹង BN, លៃតម្រូវ p ≤ 0.001, ប្រសិទ្ធភាព > 0.01) ។ការផ្លាស់ប្តូរទាំងនេះត្រូវបានកំណត់ដោយការរំខានដល់ការរំលាយអាហារ pyruvate ការរំលាយអាហារ tryptophan ការរំលាយអាហារ niacin និង nicotinamide glycolysis វដ្ត TCA និងការរំលាយអាហារ purine (រូបភាព 5a) ។បន្ទាប់មក យើងបានអនុវត្តការរំលាយអាហារគោលដៅបន្ថែមទៀត ដើម្បីផ្ទៀងផ្ទាត់ការផ្លាស់ប្តូរសំខាន់ៗដោយប្រើបរិមាណដាច់ខាត។ការ​កំណត់​សារធាតុ​រំលាយ​អាហារ​ទូទៅ​នៅ​ក្នុង​ផ្លូវ​ដែល​មាន​ការ​ផ្លាស់​ប្តូរ​ជា​ទូទៅ​ដោយ​ការ​វាស់​ស្ទង់​ម៉ាស់​បី​បួន​ជ្រុង (QQQ) ដោយ​ប្រើ​ស្តង់ដារ​មេតាបូលីត​ពិតប្រាកដ។លក្ខណៈប្រជាសាស្រ្តនៃគំរូគោលដៅនៃការសិក្សាមេតាបូឡូមីកត្រូវបានរួមបញ្ចូលក្នុងតារាងបន្ថែមទី 4។ ដោយអនុលោមតាមលទ្ធផលមេតាបូឡូមីកជាសកលរបស់យើង ការវិភាគបរិមាណបានបញ្ជាក់ថា hypoxanthine និង xanthine, pyruvate និង lactate ត្រូវបានកើនឡើងនៅក្នុង LA បើប្រៀបធៀបទៅនឹង BN និង HC (រូបភាព 5b, c, p <0.05) ។ទោះបីជាយ៉ាងណាក៏ដោយ មិនមានភាពខុសគ្នាខ្លាំងនៅក្នុងសារធាតុរំលាយអាហារទាំងនេះត្រូវបានរកឃើញរវាង BN និង HC នោះទេ។
ការវិភាគលើការពង្រឹងផ្លូវ KEGG នៃសារធាតុមេតាបូលីតខុសគ្នាខ្លាំងនៅក្នុងក្រុម LA បើប្រៀបធៀបទៅនឹងក្រុម BN និង HC ។Globaltest ដែលមានកន្ទុយពីរត្រូវបានគេប្រើ ហើយតម្លៃ p ត្រូវបានកែតម្រូវដោយប្រើវិធីសាស្ត្រ Holm-Bonferroni (បានកែតម្រូវ p ≤ 0.001 និងទំហំបែបផែន > 0.01)។b–d គ្រោងវីយូឡុងដែលបង្ហាញពីកម្រិត hypoxanthine, xanthine, lactate, pyruvate និង tryptophan ក្នុងសេរ៉ូម HC, BN, និង LA ដែលកំណត់ដោយ LC-MS/MS (n=70 ក្នុងមួយក្រុម)។បន្ទាត់ចំនុចពណ៌ស និងខ្មៅបង្ហាញពីមធ្យម និងត្រីមាសរៀងគ្នា។e គ្រោងវីយូឡុងដែលបង្ហាញពី Log2TPM ធម្មតា (transcripts per million) mRNA expression នៃ SLC7A5 និង QPRT ក្នុងសួត adenocarcinoma (n=513) បើប្រៀបធៀបទៅនឹងជាលិកាសួតធម្មតា (n=59) នៅក្នុងសំណុំទិន្នន័យ LUAD-TCGA ។ប្រអប់ពណ៌សតំណាងឱ្យជួរ interquartile បន្ទាត់ខ្មៅផ្ដេកនៅកណ្តាលតំណាងឱ្យមធ្យម ហើយបន្ទាត់ខ្មៅបញ្ឈរដែលលាតសន្ធឹងពីប្រអប់តំណាងឱ្យចន្លោះទំនុកចិត្ត 95% (CI) ។f ផែនការទំនាក់ទំនង Pearson នៃការបញ្ចេញមតិ SLC7A5 និង GAPDH នៅក្នុងសួត adenocarcinoma (n=513) និងជាលិកាសួតធម្មតា (n=59) នៅក្នុងសំណុំទិន្នន័យ TCGA ។តំបន់ពណ៌ប្រផេះតំណាងឱ្យ 95% CI ។r, មេគុណទំនាក់ទំនង Pearson ។g កម្រិត tryptophan កោសិកាធម្មតានៅក្នុងកោសិកា A549 ឆ្លងជាមួយការត្រួតពិនិត្យ shRNA មិនជាក់លាក់ (NC) និង shSLC7A5 (Sh1, Sh2) ដែលកំណត់ដោយ LC-MS/MS ។ការវិភាគស្ថិតិនៃគំរូឯករាជ្យចំនួនប្រាំក្នុងក្រុមនីមួយៗត្រូវបានបង្ហាញ។h កម្រិតកោសិកានៃ NADt (NAD សរុប រួមទាំង NAD+ និង NADH) នៅក្នុងកោសិកា A549 (NC) និង SLC7A5 កោសិកា A549 ធ្លាក់ចុះ (Sh1, Sh2) ។ការវិភាគស្ថិតិនៃគំរូឯករាជ្យចំនួនបីក្នុងក្រុមនីមួយៗត្រូវបានបង្ហាញ។i សកម្មភាព glycolytic នៃកោសិកា A549 មុន និងក្រោយការទម្លាក់ SLC7A5 ត្រូវបានវាស់ដោយអត្រាអាស៊ីតក្រៅកោសិកា (ECAR) (n = 4 សំណាកជីវសាស្រ្តឯករាជ្យក្នុងមួយក្រុម)។2-DG, 2-deoxy-D-glucose ។តេស្ត t របស់សិស្សកន្ទុយពីរត្រូវបានប្រើក្នុង (b–h)។នៅក្នុង (g–i) របារកំហុសតំណាងឱ្យមធ្យម± SD ការពិសោធន៍នីមួយៗត្រូវបានអនុវត្តបីដងដោយឯករាជ្យ ហើយលទ្ធផលគឺស្រដៀងគ្នា។ទិន្នន័យប្រភពត្រូវបានផ្តល់ជាទម្រង់ឯកសារទិន្នន័យប្រភព។
ដោយពិចារណាលើផលប៉ះពាល់ដ៏សំខាន់នៃការផ្លាស់ប្តូរការរំលាយអាហារ tryptophan នៅក្នុងក្រុម LA យើងក៏បានវាយតម្លៃកម្រិត tryptophan សេរ៉ូមនៅក្នុងក្រុម HC, BN និង LA ដោយប្រើ QQQ ។យើងបានរកឃើញថា tryptophan សេរ៉ូមត្រូវបានកាត់បន្ថយនៅ LA បើប្រៀបធៀបជាមួយ HC ឬ BN (p < 0.001, រូបភាព 5d) ដែលស្របនឹងការរកឃើញពីមុនដែលថាកម្រិត tryptophan ដែលកំពុងចរាចរគឺទាបជាងចំពោះអ្នកជំងឺដែលមានជំងឺមហារីកសួតជាងការគ្រប់គ្រងដែលមានសុខភាពល្អពីក្រុមត្រួតពិនិត្យ 33,34 ,៣៥.ការសិក្សាមួយផ្សេងទៀតដោយប្រើ PET/CT tracer 11C-methyl-L-tryptophan បានរកឃើញថាពេលវេលារក្សាសញ្ញា tryptophan នៅក្នុងជាលិកាមហារីកសួតត្រូវបានកើនឡើងយ៉ាងខ្លាំងបើប្រៀបធៀបទៅនឹងដំបៅស្រាល ឬជាលិកាធម្មតា36។យើងសន្មត់ថាការថយចុះនៃ tryptophan នៅក្នុងសេរ៉ូម LA អាចឆ្លុះបញ្ចាំងពីការស្រូបយក tryptophan សកម្មដោយកោសិកាមហារីកសួត។
វាត្រូវបានគេដឹងផងដែរថាផលិតផលចុងក្រោយនៃផ្លូវ kynurenine នៃការ catabolism tryptophan គឺ NAD + 37,38 ដែលជាស្រទាប់ខាងក្រោមដ៏សំខាន់សម្រាប់ប្រតិកម្មនៃ glyceraldehyde-3-phosphate ជាមួយនឹង 1,3-bisphosphoglycerate ក្នុង glycolysis39 ។ខណៈពេលដែលការសិក្សាពីមុនបានផ្តោតលើតួនាទីនៃ tryptophan catabolism នៅក្នុងបទប្បញ្ញត្តិនៃប្រព័ន្ធភាពស៊ាំ យើងបានស្វែងរកការបកស្រាយអន្តរកម្មរវាង tryptophan dysregulation និង glycolytic pathways ដែលបានសង្កេតនៅក្នុងការសិក្សាបច្ចុប្បន្ន។Solute transporter family 7 member 5 (SLC7A5) ត្រូវបានគេស្គាល់ថាជា tryptophan transporter43,44,45។អាស៊ីត Quinolinic phosphoribosyltransferase (QPRT) គឺជាអង់ស៊ីមដែលមានទីតាំងនៅខាងក្រោមផ្លូវ kynurenine ដែលបំលែងអាស៊ីត quinolinic ទៅ NAMN46 ។ការត្រួតពិនិត្យនៃសំណុំទិន្នន័យ LUAD TCGA បានបង្ហាញថាទាំង SLC7A5 និង QPRT ត្រូវបានធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងយ៉ាងខ្លាំងនៅក្នុងជាលិកាដុំសាច់បើប្រៀបធៀបទៅនឹងជាលិកាធម្មតា (រូបភាព 5e) ។ការកើនឡើងនេះត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅក្នុងដំណាក់កាលទី 1 និងទី 2 ក៏ដូចជាដំណាក់កាលទី 3 និងទី 4 នៃជំងឺមហារីកសួត (រូបភាពបន្ថែមទី 11) ដែលបង្ហាញពីការរំខានដំបូងនៃការរំលាយអាហាររបស់ tryptophan ដែលទាក់ទងនឹងដុំសាច់មហារីក។
លើសពីនេះទៀត សំណុំទិន្នន័យ LUAD-TCGA បានបង្ហាញពីទំនាក់ទំនងវិជ្ជមានរវាង SLC7A5 និង GAPDH mRNA កន្សោមនៅក្នុងគំរូអ្នកជំងឺមហារីក (r = 0.45, p = 1.55E-26, រូបភាព 5f) ។ផ្ទុយទៅវិញ គ្មានការជាប់ទាក់ទងគ្នាដ៏សំខាន់ណាមួយត្រូវបានរកឃើញរវាងសញ្ញាហ្សែនបែបនេះនៅក្នុងជាលិកាសួតធម្មតាទេ (r = 0.25, p = 0.06, រូបភាព 5f) ។ការធ្លាក់ចុះនៃ SLC7A5 (រូបភាពបន្ថែម 12) នៅក្នុងកោសិកា A549 បានកាត់បន្ថយកម្រិត tryptophan កោសិកា និង NAD(H) យ៉ាងខ្លាំង (រូបភាព 5g, h) ដែលបណ្តាលឱ្យមានសកម្មភាព glycolytic ថយចុះ ដូចដែលបានវាស់ដោយអត្រាអាស៊ីតក្រៅកោសិកា (ECAR) (រូបភាពទី 1) ។5i)។ដូច្នេះដោយផ្អែកលើការផ្លាស់ប្តូរមេតាប៉ូលីសនៅក្នុងសេរ៉ូម និងការរកឃើញនៅក្នុង vitro យើងសន្មត់ថាការរំលាយអាហារ tryptophan អាចផលិត NAD+ តាមរយៈផ្លូវ kynurenine និងដើរតួនាទីយ៉ាងសំខាន់ក្នុងការលើកកម្ពស់ glycolysis ក្នុងមហារីកសួត។
ការសិក្សាបានបង្ហាញថាមួយចំនួនធំនៃដុំពក pulmonary indeterminate ត្រូវបានរកឃើញដោយ LDCT អាចនាំឱ្យមានតម្រូវការសម្រាប់ការធ្វើតេស្តបន្ថែមដូចជា PET-CT, ការធ្វើកោសល្យវិច័យសួត និងការព្យាបាលលើសដោយសារតែការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យមិនពិតនៃ malignancy.31 ដូចបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 6 ។ ការសិក្សារបស់យើងបានកំណត់នូវបន្ទះនៃសារធាតុមេតាបូលីតសេរ៉ូមដែលមានតម្លៃវិភាគសក្តានុពលដែលអាចធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវកម្រិតហានិភ័យ និងការគ្រប់គ្រងជាបន្តបន្ទាប់នៃដុំពកសួតដែលបានរកឃើញដោយ CT ។
ដុំពកសួតត្រូវបានវាយតម្លៃដោយប្រើការថតរូបភាពកម្រិតទាប (LDCT) ជាមួយនឹងលក្ខណៈរូបភាពដែលបង្ហាញពីមូលហេតុស្លូតបូត ឬសាហាវ។លទ្ធផលមិនច្បាស់លាស់នៃ nodules អាចនាំឱ្យមានការតាមដានញឹកញាប់ អន្តរាគមន៍មិនចាំបាច់ និងការព្យាបាលលើស។ការដាក់បញ្ចូលអ្នកចាត់ថ្នាក់មេតាបូលីសនៃសេរ៉ូមជាមួយនឹងតម្លៃរោគវិនិច្ឆ័យអាចធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវការវាយតម្លៃហានិភ័យ និងការគ្រប់គ្រងជាបន្តបន្ទាប់នៃដុំពកសួត។ការធ្វើកោសល្យវិច័យនៃការបញ្ចេញជាតិពុល PET ។
ទិន្នន័យពីការសិក្សា NLST របស់សហរដ្ឋអាមេរិក និងការសិក្សា NELSON អឺរ៉ុប ណែនាំថា ការពិនិត្យក្រុមដែលមានហានិភ័យខ្ពស់ជាមួយនឹងការធ្វើតេលេក្រាមគណនាកម្រិតទាប (LDCT) អាចកាត់បន្ថយការស្លាប់នៃជំងឺមហារីកសួត 1,3 ។ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ការវាយតម្លៃហានិភ័យ និងការគ្រប់គ្រងគ្លីនិកជាបន្តបន្ទាប់នៃដុំពកសួតដោយចៃដន្យមួយចំនួនធំដែលត្រូវបានរកឃើញដោយ LDCT នៅតែជាបញ្ហាប្រឈមបំផុត។គោលដៅចម្បងគឺដើម្បីបង្កើនប្រសិទ្ធភាពការចាត់ថ្នាក់ត្រឹមត្រូវនៃពិធីការដែលមានមូលដ្ឋានលើ LDCT ដែលមានស្រាប់ដោយបញ្ចូល biomarkers ដែលអាចទុកចិត្តបាន។
ជីវមាត្រម៉ូលេគុលមួយចំនួន ដូចជាសារធាតុមេតាបូលីតក្នុងឈាម ត្រូវបានគេកំណត់អត្តសញ្ញាណដោយការប្រៀបធៀបមហារីកសួតជាមួយនឹងការគ្រប់គ្រងដែលមានសុខភាពល្អ15,17។នៅក្នុងការសិក្សាបច្ចុប្បន្ន យើងបានផ្តោតលើការអនុវត្តនៃការវិភាគមេតាបូឡូមីសក្នុងសេរ៉ូម ដើម្បីបែងចែករវាងដុំពកសួតស្លូត និងសាហាវ ដែលត្រូវបានរកឃើញដោយចៃដន្យដោយ LDCT ។យើងបានប្រៀបធៀបការរំលាយអាហារសេរ៉ូមសកលនៃការគ្រប់គ្រងសុខភាព (HC) ដុំមហារីកសួតស្រាល (BN) និងគំរូដំណាក់កាលទី 1 សួត adenocarcinoma (LA) ដោយប្រើការវិភាគ UPLC-HRMS ។យើងបានរកឃើញថា HC និង BN មានទម្រង់មេតាបូលីសស្រដៀងគ្នា ចំណែក LA បានបង្ហាញពីការផ្លាស់ប្តូរគួរឱ្យកត់សម្គាល់បើប្រៀបធៀបទៅនឹង HC និង BN ។យើងបានកំណត់អត្តសញ្ញាណពីរសំណុំនៃសារធាតុមេតាបូលីតសេរ៉ូមដែលបែងចែក LA ពី HC និង BN ។
គ្រោងការណ៍កំណត់អត្តសញ្ញាណដែលមានមូលដ្ឋានលើ LDCT បច្ចុប្បន្នសម្រាប់ nodules ស្លូតបូត និងសាហាវគឺផ្អែកជាចម្បងលើទំហំ ដង់ស៊ីតេ រូបសណ្ឋាន និងអត្រាកំណើននៃ nodules ក្នុងរយៈពេល 30 ។ការសិក្សាពីមុនបានបង្ហាញថាទំហំនៃ nodules មានទំនាក់ទំនងយ៉ាងជិតស្និទ្ធទៅនឹងលទ្ធភាពនៃជំងឺមហារីកសួត។សូម្បីតែចំពោះអ្នកជំងឺដែលមានហានិភ័យខ្ពស់ក៏ដោយ ហានិភ័យនៃជំងឺសាហាវនៅក្នុងថ្នាំង <6 mm គឺ <1%។ហានិភ័យនៃដុំសាច់ដែលមានទំហំពី 6 ទៅ 20 មីលីម៉ែត្រ មានចាប់ពី 8% ទៅ 64% 30។ដូច្នេះ សមាគម Fleischner បានផ្តល់អនុសាសន៍ឱ្យមានការកាត់ចេញនូវអង្កត់ផ្ចិត 6 ម.ម សម្រាប់ការតាមដាន CT ជាប្រចាំ។29 ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ការវាយតម្លៃហានិភ័យ និងការគ្រប់គ្រងដុំពកមិនកំណត់ (IPN) ធំជាង 6 មិល្លីម៉ែត្រ មិនត្រូវបានអនុវត្តគ្រប់គ្រាន់ទេ 31 .ការគ្រប់គ្រងបច្ចុប្បន្ននៃជំងឺបេះដូងពីកំណើត ជាធម្មតាផ្អែកលើការរង់ចាំយ៉ាងយកចិត្តទុកដាក់ ជាមួយនឹងការត្រួតពិនិត្យ CT ញឹកញាប់។
ដោយផ្អែកលើមេតាបូឡូមដែលមានសុពលភាព យើងបានបង្ហាញជាលើកដំបូងអំពីការត្រួតស៊ីគ្នានៃហត្ថលេខាមេតាបូឡូម រវាងបុគ្គលដែលមានសុខភាពល្អ និងដុំសាច់ស្លូត <6 ម។ភាពស្រដៀងគ្នានៃជីវសាស្រ្តគឺស្របជាមួយនឹងការរកឃើញ CT ពីមុនដែលថាហានិភ័យនៃដុំសាច់សាហាវ <6 mm គឺទាបដូចទៅនឹងប្រធានបទដែលគ្មានថ្នាំង។ ភាពស្រដៀងគ្នានៅក្នុងទម្រង់មេតាបូលីស ដែលបង្ហាញថានិយមន័យមុខងារនៃ etiology ស្លូតបូតគឺស្របដោយមិនគិតពីទំហំ nodule ។ដូច្នេះ បន្ទះមេតាបូលីតសេរ៉ូមរោគវិនិច្ឆ័យទំនើបអាចផ្តល់នូវការវិភាគតែមួយជាការធ្វើតេស្តចេញនៅពេលដែល nodules ត្រូវបានរកឃើញដំបូងនៅលើ CT និងមានសក្តានុពលកាត់បន្ថយការត្រួតពិនិត្យសៀរៀល។ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះ បន្ទះដូចគ្នានៃ biomarkers មេតាបូលីសបានសម្គាល់ដុំមហារីកសាហាវដែលមានទំហំ≥6 mm ពី nodules ស្លូត ហើយបានផ្តល់ការព្យាករណ៍ត្រឹមត្រូវសម្រាប់ IPNs ដែលមានទំហំស្រដៀងគ្នា និងលក្ខណៈរូបវិទ្យាមិនច្បាស់លាស់នៅលើរូបភាព CT ។ឧបករណ៍ចាត់ថ្នាក់មេតាបូលីសនៃសេរ៉ូមនេះដំណើរការបានល្អក្នុងការទស្សន៍ទាយពីភាពសាហាវនៃ nodules ≥6 mm ជាមួយនឹង AUC នៃ 0.927 ។សរុបមក លទ្ធផលរបស់យើងបង្ហាញថា ហត្ថលេខាមេតាបូលីសនៃសេរ៉ូមពិសេសអាចឆ្លុះបញ្ចាំងពីការផ្លាស់ប្តូរមេតាបូលីសដែលបណ្ដាលមកពីដុំសាច់ដំបូង ហើយមានតម្លៃសក្តានុពលជាអ្នកព្យាករណ៍ហានិភ័យ ដោយមិនគិតពីទំហំដុំពក។
គួរកត់សម្គាល់ថា មហារីកសួត adenocarcinoma (LUAD) និង squamous cell carcinoma (LUSC) គឺជាប្រភេទចម្បងនៃជំងឺមហារីកសួតមិនមែនកោសិកាតូច (NSCLC) ។ដោយសារ LUSC ត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់យ៉ាងខ្លាំងជាមួយនឹងការប្រើប្រាស់ថ្នាំជក់47 ហើយ LUAD គឺជាសរីរវិទ្យាទូទៅបំផុតនៃដុំពកសួតដោយចៃដន្យដែលបានរកឃើញនៅលើ CT screening48 គំរូចាត់ថ្នាក់របស់យើងត្រូវបានបង្កើតឡើងជាពិសេសសម្រាប់គំរូមហារីកដំណាក់កាលទី 1 ។លោក Wang និងសហការីក៏បានផ្តោតលើ LUAD និងកំណត់អត្តសញ្ញាណ lipid ប្រាំបួនដោយប្រើ lipidomics ដើម្បីបែងចែកមហារីកសួតដំណាក់កាលដំបូងពីបុគ្គលដែលមានសុខភាពល្អ 17 ។យើងបានសាកល្បងគំរូអ្នកចាត់ថ្នាក់បច្ចុប្បន្ននៅលើ 16 ករណីនៃដំណាក់កាល I LUSC និង 74 nodules ស្លូត ហើយបានសង្កេតឃើញភាពត្រឹមត្រូវនៃការព្យាករណ៍ LUSC ទាប (AUC 0.776) ដែលបង្ហាញថា LUAD និង LUSC អាចមានហត្ថលេខាមេតាបូលីសផ្ទាល់ខ្លួនរបស់ពួកគេ។ជាការពិត LUAD និង LUSC ត្រូវបានបង្ហាញថាមានភាពខុសគ្នានៅក្នុង etiology ប្រភពដើមជីវសាស្រ្ត និងភាពមិនប្រក្រតីនៃហ្សែន49។ដូច្នេះ ប្រភេទផ្សេងទៀតនៃ histology គួរតែត្រូវបានរួមបញ្ចូលនៅក្នុងគំរូបណ្តុះបណ្តាលសម្រាប់ការរកឃើញដោយផ្អែកតាមចំនួនប្រជាជននៃជំងឺមហារីកសួតនៅក្នុងកម្មវិធីពិនិត្យ។
នៅទីនេះ យើងបានកំណត់ផ្លូវផ្លាស់ប្តូរញឹកញាប់បំផុតចំនួនប្រាំមួយនៅក្នុង adenocarcinoma សួត បើប្រៀបធៀបជាមួយនឹងការគ្រប់គ្រងដែលមានសុខភាពល្អ និងដុំពកស្រាល។Xanthine និង hypoxanthine គឺជាសារធាតុរំលាយអាហារទូទៅនៃផ្លូវមេតាបូលីស purine ។អនុលោមតាមលទ្ធផលរបស់យើង កម្រិតមធ្យមដែលត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការរំលាយអាហារ purine ត្រូវបានកើនឡើងយ៉ាងខ្លាំងនៅក្នុងសេរ៉ូម ឬជាលិកានៃអ្នកជំងឺដែលមានជំងឺមហារីកសួត បើធៀបជាមួយនឹងការគ្រប់គ្រងដែលមានសុខភាពល្អ ឬអ្នកជំងឺនៅដំណាក់កាល preinvasive 15,50។កម្រិតខ្ពស់នៃសេរ៉ូម xanthine និង hypoxanthine អាចឆ្លុះបញ្ចាំងពី anabolism ដែលត្រូវការដោយការរីកសាយកោសិកាមហារីកយ៉ាងឆាប់រហ័ស។ភាពមិនប្រក្រតីនៃការបំប្លែងសារជាតិគ្លុយកូស គឺជាសញ្ញាសម្គាល់ដ៏ល្បីមួយនៃការរំលាយអាហាររបស់មហារីក ៥១.នៅទីនេះ យើងបានសង្កេតឃើញការកើនឡើងគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៃសារធាតុ pyruvate និង lactate នៅក្នុងក្រុម LA បើប្រៀបធៀបជាមួយនឹងក្រុម HC និង BN ដែលស្របនឹងរបាយការណ៍មុននៃភាពមិនធម្មតានៃផ្លូវ glycolytic នៅក្នុងទម្រង់មេតាបូឡូមេនៃសេរ៉ូមនៃអ្នកជំងឺមហារីកសួតមិនមែនកោសិកាតូច (NSCLC) និង ការត្រួតពិនិត្យសុខភាព។លទ្ធផលគឺស្រប 52,53 ។
សំខាន់ យើងសង្កេតឃើញការជាប់ទាក់ទងគ្នារវាងសារធាតុ pyruvate និង tryptophan នៅក្នុងសេរ៉ូមនៃសួត adenocarcinomas។កម្រិត tryptophan នៃសេរ៉ូមត្រូវបានកាត់បន្ថយនៅក្នុងក្រុម LA ធៀបនឹងក្រុម HC ឬ BN ។គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍, ការសិក្សាទ្រង់ទ្រាយធំពីមុនដោយប្រើក្រុមអនាគតបានរកឃើញថាកម្រិតទាបនៃ tryptophan ចរាចរត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការកើនឡើងហានិភ័យនៃជំងឺមហារីកសួត 54 ។Tryptophan គឺជាអាស៊ីតអាមីណូដ៏សំខាន់មួយ ដែលយើងទទួលបានពីអាហារទាំងស្រុង។យើងសន្និដ្ឋានថាការថយចុះនៃ tryptophan នៃសេរ៉ូមនៅក្នុង adenocarcinoma សួតអាចឆ្លុះបញ្ចាំងពីការថយចុះយ៉ាងឆាប់រហ័សនៃសារធាតុរំលាយអាហារនេះ។វាត្រូវបានគេស្គាល់យ៉ាងច្បាស់ថាផលិតផលចុងក្រោយនៃ tryptophan catabolism តាមរយៈផ្លូវ kynurenine គឺជាប្រភពនៃការសំយោគ de novo NAD+ ។ដោយសារតែ NAD+ ត្រូវបានផលិតជាចម្បងតាមរយៈផ្លូវសង្គ្រោះ សារៈសំខាន់នៃ NAD+ ក្នុងការរំលាយអាហារ tryptophan ក្នុងសុខភាព និងជំងឺនៅតែត្រូវបានកំណត់46។ការវិភាគរបស់យើងនៃមូលដ្ឋានទិន្នន័យ TCGA បានបង្ហាញថាការបញ្ចេញមតិនៃ tryptophan transporter solute transporter 7A5 (SLC7A5) ត្រូវបានកើនឡើងយ៉ាងខ្លាំងនៅក្នុង adenocarcinoma សួតបើប្រៀបធៀបជាមួយនឹងការគ្រប់គ្រងធម្មតា ហើយត្រូវបានទាក់ទងជាវិជ្ជមានជាមួយនឹងការបញ្ចេញមតិនៃអង់ស៊ីម glycolytic GAPDH ។ការសិក្សាពីមុនបានផ្តោតជាសំខាន់លើតួនាទីរបស់ tryptophan catabolism ក្នុងការទប់ស្កាត់ការឆ្លើយតបនៃប្រព័ន្ធភាពស៊ាំប្រឆាំងដុំសាច់40,41,42។នៅទីនេះយើងបង្ហាញថាការទប់ស្កាត់ការស្រូបយកសារធាតុ tryptophan ដោយការទម្លាក់ SLC7A5 នៅក្នុងកោសិកាមហារីកសួត បណ្តាលឱ្យមានការថយចុះជាបន្តបន្ទាប់នៃកម្រិត NAD កោសិកា និងការបន្ថយសកម្មភាព glycolytic ស្របគ្នា។សរុបមក ការសិក្សារបស់យើងផ្តល់នូវមូលដ្ឋានជីវសាស្រ្តសម្រាប់ការផ្លាស់ប្តូរការរំលាយអាហារក្នុងសេរ៉ូមដែលទាក់ទងនឹងការផ្លាស់ប្តូរសាហាវនៃមហារីកសួត។
ការផ្លាស់ប្តូរ EGFR គឺជាការផ្លាស់ប្តូរអ្នកបើកបរទូទៅបំផុតចំពោះអ្នកជំងឺដែលមាន NSCLC ។នៅក្នុងការសិក្សារបស់យើងយើងបានរកឃើញថាអ្នកជំងឺដែលមានការផ្លាស់ប្តូរ EGFR (n = 41) មានទម្រង់មេតាប៉ូលីសទាំងមូលស្រដៀងនឹងអ្នកជំងឺដែលមាន EGFR ប្រភេទព្រៃ (n = 31) ទោះបីជាយើងបានរកឃើញការថយចុះកម្រិតសេរ៉ូមនៃអ្នកជំងឺ EGFR mutant មួយចំនួនចំពោះអ្នកជំងឺ acylcarnitine ក៏ដោយ។មុខងារដែលបានបង្កើតឡើងនៃ acylcarnitines គឺដើម្បីដឹកជញ្ជូនក្រុម acyl ពី cytoplasm ចូលទៅក្នុងម៉ាទ្រីស mitochondrial ដែលនាំឱ្យមានការកត់សុីនៃអាស៊ីតខ្លាញ់ដើម្បីបង្កើតថាមពល 55 ។ស្របជាមួយនឹងការរកឃើញរបស់យើង ការសិក្សាថ្មីៗនេះក៏បានកំណត់ទម្រង់មេតាបូឡូមស្រដៀងគ្នារវាងដុំសាច់ប្រភេទ EGFR mutant និង EGFR ដោយការវិភាគលើការរំលាយអាហារសកលនៃគំរូជាលិកាសួត 102 adenocarcinoma 50 ។គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍មាតិកា acylcarnitine ក៏ត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងក្រុម EGFR mutant ផងដែរ។ដូច្នេះថាតើការផ្លាស់ប្តូរកម្រិត acylcarnitine ឆ្លុះបញ្ចាំងពីការផ្លាស់ប្តូរមេតាបូលីសដែលបង្កឡើងដោយ EGFR និងផ្លូវម៉ូលេគុលដែលនៅពីក្រោម អាចជាលទ្ធផលនៃការសិក្សាបន្ថែម។
សរុបសេចក្តីមក ការសិក្សារបស់យើងបង្កើតកម្មវិធីចាត់ថ្នាក់មេតាបូលីសសេរ៉ូមសម្រាប់ការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យឌីផេរ៉ង់ស្យែលនៃដុំពកសួត និងស្នើដំណើរការការងារដែលអាចបង្កើនប្រសិទ្ធភាពការវាយតម្លៃហានិភ័យ និងសម្របសម្រួលការគ្រប់គ្រងគ្លីនិកដោយផ្អែកលើការពិនិត្យ CT scan ។
ការសិក្សានេះត្រូវបានអនុម័តដោយគណៈកម្មាធិការសីលធម៌នៃមន្ទីរពេទ្យមហារីកសាកលវិទ្យាល័យ Sun Yat-sen មន្ទីរពេទ្យសម្ព័ន្ធទីមួយនៃសាកលវិទ្យាល័យ Sun Yat-sen និងគណៈកម្មាធិការសីលធម៌នៃមន្ទីរពេទ្យមហារីកសាកលវិទ្យាល័យ Zhengzhou ។នៅក្នុងការរកឃើញ និងក្រុមផ្ទៀងផ្ទាត់ផ្ទៃក្នុង សេរ៉ា 174 ពីបុគ្គលដែលមានសុខភាពល្អ និង 244 សេរ៉ាពីដុំពកត្រូវបានប្រមូលពីបុគ្គលដែលទទួលការពិនិត្យសុខភាពប្រចាំឆ្នាំនៅនាយកដ្ឋានគ្រប់គ្រង និងការពារជំងឺមហារីក មជ្ឈមណ្ឌលមហារីកសាកលវិទ្យាល័យស៊ុនយ៉ាតសេន និង 166 ដុំសាច់ស្លូត។សេរ៉ូម។មហារីកសួតដំណាក់កាលទី 1 ត្រូវបានប្រមូលពីមជ្ឈមណ្ឌលមហារីកសាកលវិទ្យាល័យ Sun Yat-sen ។នៅក្នុងក្រុមពិនិត្យសុពលភាពខាងក្រៅ មាន 48 ករណីនៃដុំសាច់ស្រាល 39 ករណីនៃជំងឺមហារីកសួតដំណាក់កាលទី 1 ពីមន្ទីរពេទ្យសាខាទីមួយនៃសាកលវិទ្យាល័យស៊ុនយ៉ាតសេន និង 24 ករណីនៃជំងឺមហារីកសួតដំណាក់កាលទី 1 ពីមន្ទីរពេទ្យមហារីកចេងចូវ។មជ្ឈមណ្ឌលមហារីកនៃសាកលវិទ្យាល័យ Sun Yat-sen ក៏បានប្រមូលករណីមហារីកសួតកោសិកា squamous ដំណាក់កាលទី I ចំនួន 16 ករណី ដើម្បីសាកល្បងសមត្ថភាពវិនិច្ឆ័យនៃប្រភេទមេតាបូលីសដែលបានបង្កើតឡើង (លក្ខណៈអ្នកជំងឺត្រូវបានបង្ហាញក្នុងតារាងបន្ថែម 5) ។គំរូពីក្រុមស្រាវជ្រាវរកឃើញ និងក្រុមផ្តល់សុពលភាពផ្ទៃក្នុងត្រូវបានប្រមូលនៅចន្លោះខែមករា ឆ្នាំ 2018 ដល់ខែឧសភា ឆ្នាំ 2020។ គំរូសម្រាប់ក្រុមត្រួតពិនិត្យសុពលភាពខាងក្រៅត្រូវបានប្រមូលនៅចន្លោះខែសីហា ឆ្នាំ 2021 ដល់ខែតុលា ឆ្នាំ 2022។ ដើម្បីកាត់បន្ថយភាពលំអៀងយេនឌ័រ ប្រមាណចំនួនករណីបុរស និងស្ត្រីត្រូវបានចាត់ឱ្យទៅនីមួយៗ។ ក្រុម។ក្រុម Discovery និងក្រុមត្រួតពិនិត្យផ្ទៃក្នុង។ភេទរបស់អ្នកចូលរួមត្រូវបានកំណត់ដោយផ្អែកលើរបាយការណ៍ខ្លួនឯង។ការយល់ព្រមតាមព័ត៌មានត្រូវបានទទួលពីអ្នកចូលរួមទាំងអស់ ហើយគ្មានសំណងណាមួយត្រូវបានផ្តល់ជូនឡើយ។មុខវិជ្ជាដែលមានដុំសាច់ស្លូតបូត គឺជាអ្នកដែលមានពិន្ទុស្កែន CT មានស្ថេរភាពនៅអាយុពី 2 ទៅ 5 ឆ្នាំនៅពេលធ្វើការវិភាគ លើកលែងតែករណី 1 ពីគំរូសុពលភាពខាងក្រៅ ដែលត្រូវបានប្រមូលជាមុន និងធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យដោយរោគវិទ្យា។លើកលែងតែជំងឺរលាកទងសួតរ៉ាំរ៉ៃ។ករណីមហារីកសួត adenocarcinoma ត្រូវបានប្រមូលមុនពេលវះកាត់សួត និងបញ្ជាក់ដោយការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យរោគ។សំណាក​ឈាម​តម​អាហារ​ត្រូវ​បាន​ប្រមូល​ក្នុង​បំពង់​បំបែក​សេរ៉ូម​ដោយ​មិន​មាន​សារធាតុ​ប្រឆាំង​នឹង​ការ​កក​ឈាម។សំណាកឈាមត្រូវបានកកក្នុងរយៈពេល 1 ម៉ោងនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ ហើយបន្ទាប់មក centrifuged នៅ 2851 × g រយៈពេល 10 នាទីនៅ 4 ° C ដើម្បីប្រមូល serum supernatant ។អាលីកូតសេរ៉ូមត្រូវបានបង្កកនៅ -80 ° C រហូតដល់ការទាញយកសារធាតុរំលាយអាហារ។នាយកដ្ឋានការពារជំងឺមហារីក និងការពិនិត្យវេជ្ជសាស្ត្រនៃមជ្ឈមណ្ឌលមហារីកសាកលវិទ្យាល័យ Sun Yat-sen បានប្រមូលសេរ៉ូមពីម្ចាស់ជំនួយដែលមានសុខភាពល្អចំនួន 100 រួមទាំងបុរស និងស្ត្រីដែលមានអាយុចាប់ពី 40 ឆ្នាំដល់ 55 ឆ្នាំ។បរិមាណស្មើគ្នានៃសំណាកអ្នកបរិច្ចាគនីមួយៗត្រូវបានលាយបញ្ចូលគ្នា អាងលទ្ធផលត្រូវបាន aliquoted និងរក្សាទុកនៅ -80 ° C ។ល្បាយសេរ៉ូមត្រូវបានប្រើជាឯកសារយោងសម្រាប់ការត្រួតពិនិត្យគុណភាព និងស្តង់ដារទិន្នន័យ។
សេរ៉ូមយោង និងសំណាកសាកល្បងត្រូវបានរលាយ ហើយសារធាតុរំលាយត្រូវបានស្រង់ចេញដោយប្រើវិធីសាស្ត្រស្រង់ចេញរួមបញ្ចូលគ្នា (MTBE/មេតាណុល/ទឹក) 56 .ដោយសង្ខេប 50 μlនៃសេរ៉ូមត្រូវបានលាយជាមួយនឹង 225 μlនៃមេតាណុលត្រជាក់ទឹកកក និង 750 μlនៃ ice-cold methyl tert-butyl ether (MTBE) ។កូរ​ល្បាយ​ហើយ​ដាក់​លើ​ទឹកកក​រយៈពេល ១ ម៉ោង។សំណាកទាំងនោះត្រូវបានលាយបញ្ចូលគ្នា និង vortex លាយជាមួយទឹក MS-grade 188 μl ដែលមានស្តង់ដារខាងក្នុង (13C-lactate, 13C3-pyruvate, 13C-methionine និង 13C6-isoleucine ដែលទិញពី Cambridge Isotope Laboratories)។បន្ទាប់មក ល្បាយនេះត្រូវបានគេដាក់កណ្តាលនៅ 15,000 × g សម្រាប់រយៈពេល 10 នាទីនៅសីតុណ្ហភាព 4 ° C ហើយដំណាក់កាលទាបត្រូវបានផ្ទេរទៅក្នុងបំពង់ពីរ (125 μLនីមួយៗ) សម្រាប់ការវិភាគ LC-MS ក្នុងរបៀបវិជ្ជមាន និងអវិជ្ជមាន។ជាចុងក្រោយ គំរូត្រូវបានហួតទៅជាស្ងួតនៅក្នុងម៉ាស៊ីនបូមធូលីដែលមានល្បឿនលឿន។
សារធាតុរំលាយស្ងួតត្រូវបានបង្កើតឡើងវិញក្នុង 120 μl នៃ 80% acetonitrile, vortexed សម្រាប់ 5 នាទី និង centrifuged នៅ 15,000 × g សម្រាប់ 10 នាទីនៅ 4 ° C ។សារធាតុ Supernatants ត្រូវបានផ្ទេរទៅក្នុងដបកែវ amber ជាមួយនឹង microinserts សម្រាប់ការសិក្សាអំពីមេតាបូលីស។ការវិភាគមេតាបូឡូមដែលមិនបានកំណត់គោលដៅនៅលើវេទិកា UPLC-HRMS នៃអង្គធាតុរាវដែលមានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់បំផុត។មេតាបូលីតត្រូវបានបំបែកដោយប្រើប្រព័ន្ធ Dionex Ultimate 3000 UPLC និងជួរឈរ ACQUITY BEH Amide (2.1 × 100 mm, 1.7 μm, Waters) ។នៅក្នុងរបៀបអ៊ីយ៉ុងវិជ្ជមាន ដំណាក់កាលចល័តគឺ 95% (A) និង 50% acetonitrile (B) ដែលនីមួយៗមាន 10 mmol/L ammonium acetate និង 0.1% អាស៊ីត formic ។នៅក្នុងរបៀបអវិជ្ជមាន ដំណាក់កាលចល័ត A និង B មាន 95% និង 50% acetonitrile រៀងគ្នា ដំណាក់កាលទាំងពីរមាន 10 mmol/L ammonium acetate, pH = 9 ។ កម្មវិធីជម្រាលមានដូចខាងក្រោម៖ 0–0.5 នាទី, 2% B;0.5-12 នាទី, 2-50% B;12–14 នាទី, 50–98% B;14–16 នាទី, 98% B;១៦–១៦.១។អប្បបរមា 98 -2% B;16.1–20 នាទី, 2% B. ជួរឈរត្រូវបានរក្សានៅសីតុណ្ហភាព 40°C និងគំរូនៅ 10°C នៅក្នុង autosampler។អត្រាលំហូរគឺ 0.3 មីលីលីត្រ / នាទីបរិមាណចាក់គឺ 3 μl។ឧបករណ៍វាស់ស្ទង់ម៉ាស Q-Exactive Orbitrap (Thermo Fisher Scientific) ដែលមានប្រភពអ៊ីយ៉ូដអេឡិចត្រុស (ESI) ត្រូវបានដំណើរការក្នុងរបៀបស្កែនពេញលេញ និងភ្ជាប់ជាមួយរបៀបត្រួតពិនិត្យ ddMS2 ដើម្បីប្រមូលទិន្នន័យដ៏ធំ។ប៉ារ៉ាម៉ែត្រ MS ត្រូវបានកំណត់ដូចខាងក្រោម: វ៉ុលបាញ់ +3.8 kV /- 3.2 kV, សីតុណ្ហភាព capillary 320 ° C, របាំងការពារឧស្ម័ន 40 arb, ឧស្ម័នជំនួយ 10 arb, សីតុណ្ហភាពឧបករណ៍កំដៅស៊ើបអង្កេត 350 ° C, ជួរស្កេន 70-1050 m / h, ដំណោះស្រាយ។70 000. ទិន្នន័យត្រូវបានទទួលដោយប្រើ Xcalibur 4.1 (Thermo Fisher Scientific)។
ដើម្បីវាយតម្លៃគុណភាពទិន្នន័យ គំរូត្រួតពិនិត្យគុណភាពរួមបញ្ចូលគ្នា (QC) ត្រូវបានបង្កើតដោយការដក 10 μL aliquots នៃ supernatant ចេញពីគំរូនីមួយៗ។ការចាក់គំរូត្រួតពិនិត្យគុណភាពចំនួនប្រាំមួយត្រូវបានវិភាគនៅដើមដំបូងនៃលំដាប់វិភាគដើម្បីវាយតម្លៃស្ថេរភាពនៃប្រព័ន្ធ UPLC-MS ។បន្ទាប់មកសំណាកត្រួតពិនិត្យគុណភាពត្រូវបានណែនាំជាទៀងទាត់ទៅក្នុងបាច់។គំរូសេរ៉ូមទាំង 11 បាច់នៅក្នុងការសិក្សានេះត្រូវបានវិភាគដោយ LC-MS ។Aliquots នៃល្បាយសេរ៉ូមពីម្ចាស់ជំនួយដែលមានសុខភាពល្អចំនួន 100 ត្រូវបានគេប្រើប្រាស់ជាឯកសារយោងនៅក្នុងបណ្តុំរៀងៗខ្លួន ដើម្បីតាមដានដំណើរការស្រង់ចេញ និងកែសម្រួលសម្រាប់ផលប៉ះពាល់ជាបាច់។ការវិភាគមេតាបូឡូមដែលមិនកំណត់គោលដៅនៃក្រុមការរកឃើញ ក្រុមត្រួតពិនិត្យសុពលភាពខាងក្នុង និងក្រុមត្រួតពិនិត្យសុពលភាពខាងក្រៅត្រូវបានអនុវត្តនៅមជ្ឈមណ្ឌលមេតាបូឡូមិកនៃសាកលវិទ្យាល័យស៊ុនយ៉ាតសេន។មន្ទីរពិសោធន៍ខាងក្រៅនៃមជ្ឈមណ្ឌលវិភាគ និងតេស្តបច្ចេកវិទ្យានៃសាកលវិទ្យាល័យក្វាងទុង ក៏បានវិភាគគំរូចំនួន 40 ពីក្រុមខាងក្រៅ ដើម្បីសាកល្បងដំណើរការនៃគំរូអ្នកចាត់ថ្នាក់។
បន្ទាប់ពីការស្រង់ចេញ និងបង្កើតឡើងវិញ បរិមាណដាច់ខាតនៃសារធាតុមេតាបូលីតសេរ៉ូមត្រូវបានវាស់ដោយប្រើ ប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់នៃវត្ថុធាតុរាវ chromatography-tandem mass spectrometry (Agilent 6495 triple quadrupole) ជាមួយនឹងប្រភពអ៊ីយ៉ូដ electrospray (ESI) នៅក្នុងរបៀបតាមដានប្រតិកម្មច្រើន (MRM) ។ជួរឈរ ACQUITY BEH Amide (2.1 × 100 mm, 1.7 μm, Waters) ត្រូវបានប្រើដើម្បីបំបែកសារធាតុរំលាយ។ដំណាក់កាលចល័តមាន 90% (A) និង 5% acetonitrile (B) ជាមួយនឹង 10 mmol/L ammonium acetate និងដំណោះស្រាយអាម៉ូញាក់ 0.1% ។កម្មវិធីជម្រាលមានដូចខាងក្រោម៖ 0–1.5 នាទី, 0% B;1.5–6.5 នាទី, 0–15% B;6.5–8 នាទី 15% B;8–8.5 នាទី, 15%–0% B;8.5–11.5 នាទី, 0%B ។ជួរឈរត្រូវបានរក្សាទុកនៅ 40 ° C និងគំរូនៅ 10 ° C នៅក្នុង autosampler ។អត្រាលំហូរគឺ 0.3 mL / នាទី ហើយបរិមាណចាក់គឺ 1 μL។ប៉ារ៉ាម៉ែត្រ MS ត្រូវបានកំណត់ដូចខាងក្រោម: វ៉ុល capillary ± 3.5 kV, សម្ពាធ nebulizer 35 psi, លំហូរឧស្ម័ន sheath 12 L / នាទី, សីតុណ្ហភាពឧស្ម័ន sheath 350 ° C, សីតុណ្ហភាពឧស្ម័នស្ងួត 250 ° C និងលំហូរឧស្ម័នស្ងួត 14 លីត្រ / នាទី។ការបំប្លែង MRM នៃ tryptophan, pyruvate, lactate, hypoxanthine និង xanthine គឺ 205.0–187.9, 87.0–43.4, 89.0–43.3, 135.0–92.3 និង 151.0–107 ។9 រៀងៗខ្លួន។ទិន្នន័យត្រូវបានប្រមូលដោយប្រើ Mass Hunter B.07.00 (Agilent Technologies)។សម្រាប់សំណាកសេរ៉ូម tryptophan, pyruvate, lactate, hypoxanthine និង xanthine ត្រូវបានគេកំណត់បរិមាណដោយប្រើខ្សែកោងក្រិតនៃដំណោះស្រាយល្បាយស្តង់ដារ។សម្រាប់សំណាកកោសិកា មាតិកា tryptophan ត្រូវបានធ្វើឱ្យមានលក្ខណៈធម្មតាតាមស្តង់ដារខាងក្នុង និងម៉ាសប្រូតេអ៊ីនកោសិកា។
ការទាញយកកំពូល (m/z និងពេលវេលារក្សាទុក (RT)) ត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើ Compound Discovery 3.1 និង TraceFinder 4.0 (Thermo Fisher Scientific) ។ដើម្បីលុបបំបាត់ភាពខុសគ្នាដែលមានសក្តានុពលរវាងបណ្តុំ ចំណុចកំពូលនៃលក្ខណៈនីមួយៗនៃគំរូតេស្តត្រូវបានបែងចែកដោយចំណុចកំពូលនៃសម្ភារៈយោងពីបាច់ដូចគ្នា ដើម្បីទទួលបានភាពសម្បូរបែបដែលទាក់ទង។គម្លាតស្តង់ដារដែលទាក់ទងនៃស្តង់ដារខាងក្នុងមុន និងក្រោយការធ្វើស្តង់ដារត្រូវបានបង្ហាញក្នុងតារាងបន្ថែម 6។ ភាពខុសគ្នារវាងក្រុមទាំងពីរត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈដោយអត្រាការរកឃើញមិនពិត (FDR<0.05, Wilcoxon signed test) និងការផ្លាស់ប្តូរផ្នត់ (>1.2 ឬ <0.83)។ទិន្នន័យ MS ឆៅនៃលក្ខណៈពិសេសដែលបានស្រង់ចេញ និងទិន្នន័យ MS ដែលត្រូវបានកែតម្រូវដោយសេរ៉ូមយោងត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងទិន្នន័យបន្ថែម 1 និងទិន្នន័យបន្ថែម 2 រៀងគ្នា។ចំណារពន្យល់កំពូលត្រូវបានអនុវត្តដោយផ្អែកលើកម្រិតកំណត់ចំនួនបួន រួមទាំងសារធាតុរំលាយអាហារដែលបានកំណត់ សមាសធាតុដែលបានកំណត់ចំណាំ ថ្នាក់សមាសធាតុដែលបានកំណត់លក្ខណៈដោយដាក់ និងសមាសធាតុមិនស្គាល់ 22 ។ផ្អែកលើការស្វែងរកមូលដ្ឋានទិន្នន័យនៅក្នុង Compound Discovery 3.1 (mzCloud, HMDB, Chempider) សមាសធាតុជីវសាស្រ្តដែលមានស្តង់ដារត្រឹមត្រូវដែលត្រូវគ្នានឹង MS/MS ឬចំណារពន្យល់អំពីការប្រកួតពិតប្រាកដនៅក្នុង mzCloud (ពិន្ទុ> 85) ឬ Chempider ទីបំផុតត្រូវបានជ្រើសរើសជាអន្តរការីរវាងមេតាបូឡូមឌីផេរ៉ង់ស្យែល។ចំណារពន្យល់កំពូលសម្រាប់លក្ខណៈពិសេសនីមួយៗត្រូវបានរួមបញ្ចូលនៅក្នុងទិន្នន័យបន្ថែម 3. MetaboAnalyst 5.0 ត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការវិភាគឯកតានៃបរិមាណមេតាបូលីតដែលមានលក្ខណៈធម្មតាសរុប។MetaboAnalyst 5.0 ក៏បានវាយតម្លៃការវិភាគលើការពង្រឹងផ្លូវ KEGG ដោយផ្អែកលើសារធាតុមេតាបូលីតខុសគ្នាខ្លាំង។ការវិភាគសមាសធាតុចម្បង (PCA) និងការវិភាគការរើសអើងផ្នែកការេតិចតួចបំផុត (PLS-DA) ត្រូវបានវិភាគដោយប្រើកញ្ចប់កម្មវិធី ropls (v.1.26.4) ជាមួយនឹងការធ្វើឱ្យធម្មតាជង់ និងការធ្វើមាត្រដ្ឋានដោយស្វ័យប្រវត្តិ។គំរូ biomarker មេតាបូលីតដ៏ល្អប្រសើរសម្រាប់ការទស្សន៍ទាយពីជំងឺដុំសាច់ត្រូវបានបង្កើតដោយប្រើការតំរែតំរង់នៃភស្តុភារគោលពីរជាមួយនឹងការរួញតូចដាច់ខាត និងប្រតិបត្តិករជ្រើសរើស (LASSO, R package v.4.1-3) ។ការអនុវត្តនៃគំរូរើសអើងនៅក្នុងសំណុំការរកឃើញ និងសុពលភាពត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈដោយការប៉ាន់ស្មាន AUC ដោយផ្អែកលើការវិភាគ ROC យោងតាមកញ្ចប់ pROC (v.1.18.0.) ។ការកាត់ផ្តាច់ប្រូបាប៊ីលីតេល្អបំផុតត្រូវបានទទួលដោយផ្អែកលើសន្ទស្សន៍ Youden អតិបរមានៃគំរូ (ភាពប្រែប្រួល + ភាពជាក់លាក់ - 1) ។គំរូ​ដែល​មាន​តម្លៃ​តិច​ឬ​ធំ​ជាង​កម្រិត​នឹង​ត្រូវ​បាន​ព្យាករ​ថា​ជា​ដុំ​សាច់​ស្រាល និង​មហារីក​សួត​រៀង​គ្នា។
កោសិកា A549 (#CCL-185, American Type Culture Collection) ត្រូវបានដាំដុះនៅក្នុងឧបករណ៍ផ្ទុក F-12K ដែលមាន 10% FBS ។ឈុតសក់ខ្លី RNA (shRNA) ដែលកំណត់គោលដៅ SLC7A5 និងវត្ថុបញ្ជាដែលមិនកំណត់គោលដៅ (NC) ត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុងវ៉ិចទ័រ lentiviral pLKO.1-puro ។លំដាប់ antisense នៃ shSLC7A5 មានដូចខាងក្រោម៖ Sh1 (5′-GGAGAAAACCTGATGAACAGTT-3′), Sh2 (5′-GCCGTGGACTTCGGAACTAT-3′)។អង់ទីករទៅនឹង SLC7A5 (#5347) និង tubulin (#2148) ត្រូវបានទិញពីបច្ចេកវិទ្យា Cell Signaling Technology។អង់ទីករទៅនឹង SLC7A5 និង tubulin ត្រូវបានគេប្រើក្នុងកម្រិត 1:1000 សម្រាប់ការវិភាគបស្ចិមប្រទេស។
Seahorse XF Glycolytic Stress Test វាស់កម្រិតជាតិអាស៊ីតក្រៅកោសិកា (ECAR) ។នៅក្នុងការវិភាគ គ្លុយកូស oligomycin A និង 2-DG ត្រូវបានគ្រប់គ្រងជាបន្តបន្ទាប់ ដើម្បីសាកល្បងសមត្ថភាព glycolytic កោសិកា ដូចដែលបានវាស់ដោយ ECAR ។
កោសិកា A549 ឆ្លងជាមួយការគ្រប់គ្រងមិនកំណត់គោលដៅ (NC) និង shSLC7A5 (Sh1, Sh2) ត្រូវបានលាបពេញមួយយប់ក្នុងចានដែលមានអង្កត់ផ្ចិត 10 សង់ទីម៉ែត្រ។សារធាតុរំលាយកោសិកាត្រូវបានស្រង់ចេញជាមួយ 1 មីលីលីត្រនៃទឹកកកត្រជាក់ 80% មេតាណុល aqueous ។កោសិកានៅក្នុងសូលុយស្យុងមេតាណុលត្រូវបានខ្ចាត់ខ្ចាយ ប្រមូលចូលទៅក្នុងបំពង់ថ្មី ហើយដាក់កណ្តាលនៅសីតុណ្ហភាព 15,000 × g រយៈពេល 15 នាទីនៅសីតុណ្ហភាព 4°C ។ប្រមូល 800 µl នៃ supernatant និងស្ងួតដោយប្រើម៉ាស៊ីនបូមធូលីល្បឿនលឿន។បន្ទាប់មក គ្រាប់មេតាបូលីតស្ងួតត្រូវបានវិភាគសម្រាប់កម្រិត tryptophan ដោយប្រើ LC-MS/MS ដូចដែលបានរៀបរាប់ខាងលើ។កម្រិតកោសិកា NAD(H) នៅក្នុងកោសិកា A549 (NC និង shSLC7A5) ត្រូវបានវាស់ដោយប្រើឧបករណ៍វាស់ពណ៌ NAD+/NADH បរិមាណ (#K337, BioVision) យោងតាមការណែនាំរបស់អ្នកផលិត។កម្រិតប្រូតេអ៊ីនត្រូវបានវាស់សម្រាប់សំណាកនីមួយៗ ដើម្បីធ្វើឱ្យបរិមាណមេតាបូលីតមានលក្ខណៈធម្មតា។
គ្មានវិធីសាស្រ្តស្ថិតិត្រូវបានប្រើដើម្បីកំណត់ជាមុននូវទំហំគំរូទេ។ការសិក្សាមេតាបូឡូមីកពីមុនដែលផ្តោតលើការរកឃើញ biomarker15,18 ត្រូវបានចាត់ទុកថាជាស្តង់ដារសម្រាប់ការកំណត់ទំហំ ហើយបើប្រៀបធៀបទៅនឹងរបាយការណ៍ទាំងនេះ គំរូរបស់យើងគឺគ្រប់គ្រាន់។គ្មានគំរូត្រូវបានដកចេញពីក្រុមសិក្សាទេ។សំណាកសេរ៉ូមត្រូវបានចាត់ចែងដោយចៃដន្យទៅក្រុមរកឃើញ (306 ករណី 74.6%) និងក្រុមផ្ទៀងផ្ទាត់ផ្ទៃក្នុង (104 ករណី 25.4%) សម្រាប់ការសិក្សាមេតាបូលីសដែលមិនកំណត់គោលដៅ។យើងក៏បានជ្រើសរើសដោយចៃដន្យនូវករណីចំនួន 70 ពីក្រុមនីមួយៗពីការរកឃើញដែលបានកំណត់សម្រាប់ការសិក្សាមេតាបូលីសគោលដៅ។អ្នកស៊ើបអង្កេតត្រូវបានខ្វាក់ភ្នែកចំពោះការចាត់តាំងជាក្រុមកំឡុងពេលប្រមូល និងវិភាគទិន្នន័យ LC-MS ។ការវិភាគស្ថិតិនៃទិន្នន័យមេតាបូឡូមិក និងការពិសោធន៍កោសិកាត្រូវបានពិពណ៌នានៅក្នុងផ្នែកលទ្ធផលរៀងៗខ្លួន រឿងព្រេង និងវិធីសាស្ត្រ។បរិមាណនៃ tryptophan កោសិកា NADT និងសកម្មភាព glycolytic ត្រូវបានអនុវត្តបីដងដោយឯករាជ្យជាមួយនឹងលទ្ធផលដូចគ្នា។
សម្រាប់ព័ត៌មានបន្ថែមអំពីការរចនាការសិក្សា សូមមើល របាយការណ៍ផលប័ត្រធម្មជាតិ សង្ខេបដែលភ្ជាប់ជាមួយអត្ថបទនេះ។
ទិន្នន័យ MS ឆៅនៃលក្ខណៈពិសេសដែលបានស្រង់ចេញ និងទិន្នន័យ MS ធម្មតានៃសេរ៉ូមយោងត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងទិន្នន័យបន្ថែម 1 និងទិន្នន័យបន្ថែម 2 រៀងគ្នា។ចំណារពន្យល់កំពូលសម្រាប់លក្ខណៈពិសេសឌីផេរ៉ង់ស្យែលត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងទិន្នន័យបន្ថែម 3. សំណុំទិន្នន័យ LUAD TCGA អាចទាញយកបានពី https://portal.gdc.cancer.gov/ ។ទិន្នន័យ​បញ្ចូល​សម្រាប់​ការ​គូស​ក្រាហ្វិក​ត្រូវ​បាន​ផ្ដល់​ក្នុង​ទិន្នន័យ​ប្រភព។ទិន្នន័យប្រភពត្រូវបានផ្តល់ជូនសម្រាប់អត្ថបទនេះ។
ក្រុមសិក្សាស្រាវជ្រាវជាតិ សួត ជាដើម កាត់បន្ថយអត្រាមរណៈនៃជំងឺមហារីកសួត ជាមួយនឹងការធ្វើតេលេក្រាមគណនាកម្រិតទាប។ភាគខាងជើងនៃប្រទេសអង់គ្លេស។J. Med ។៣៦៥, ៣៩៥–៤០៩ (២០១១)។
Kramer, BS, Berg, KD, Aberle, DR និង Prophet, PC Lung cancer screening using low-dose helical CT: លទ្ធផលពី National Lung Screening Study (NLST) ។J. Med ។អេក្រង់ 18, 109–111 (2011) ។
De Koning, HJ, et al ។ការកាត់បន្ថយការស្លាប់នៃជំងឺមហារីកសួតជាមួយនឹងការពិនិត្យ CT កម្រិតសំឡេងនៅក្នុងការសាកល្បងចៃដន្យ។ភាគខាងជើងនៃប្រទេសអង់គ្លេស។J. Med ។៣៨២, ៥០៣–៥១៣ (ឆ្នាំ ២០២០)។